等温扩增技术(RCA)是一种利用重组酶和聚合酶进行DNA扩增的方法。RCA的全称为Rolling Circle Amplification,即滚环扩增。该方法使用一种称为Phi29 DNA聚合酶的特殊聚合酶,以及一种称为单链DNA结合蛋白的重组酶。首先,重组酶结合到单链DNA上并形成一个蛋白质-DNA复合物。然后,Phi29 DNA聚合酶
将免疫检测与RCA(滚环扩增)技术相结合。在抗体包被的顺磁性微珠上形成单个免疫复合物三明治并用链霉亲和素-DNA 偶联物标记后,对微珠进行滚环扩增 (RCA) 以产生连接到每个免疫复合物的长连接子。在 RCA 期间,荧光标记的DNA探针与连接子杂交,以在携带完整免疫复合物三明治的珠子上产生局部荧光信号。RCA后,将...
当使用圆形挂锁探针作为模型目标分析物时,PEF读数表明,与直接标记相比,报告的RCA实施将检测限(LOD)从13 pM提高到高fM浓度。相应的增强因子约为2个数量级,这与所开发的生物界面在瞬时表面等离子场中折叠的RCA链所附着的荧光团发射体的最大数量一致。...
2. 技术特点(1)RCA检测模板需为单链环状结构,若样品不符合要求,则需进行变性退火或环化处理;(2)线性扩增产物为大量与环状模板互补的重复线形单链DNA,可与探针直接结合实现信号放大,且连续的扩增产物可避免信号扩散,适用于原位杂交检测;(3)线性RCA的效率可达到105倍,指数RCA的效率可达到109倍,可实现单分子检测水平...
(10分)滚环扩增技术(RCA)是借鉴自然界中病原生物体环状DNA分子滚环式复制方式发展起来的一种核酸扩增方法,在致病菌、核酸肿瘤标记物、蛋白质,生物小分子和病毒检测领域有着广泛应用。图1为RCA原理示意图。具核梭杆菌为一种强粘附性消化道细菌,侵人肠粘膜后可诱导局部炎症和细胞因子的表达增加,导致结直肠肿瘤的形成...
RCA技术的改进方案 1)引入O3作为氧化剂,氧化有机物、金属。当然也形成表面氧化膜SiO2。O3气体易分解,氧化性很强,而且无污染。使用方法:纯水中充入O3作为清洗液,替代H2SO4+H2O2的作为清洗液。2)改进SC-1 降低粗糙度—降低NH3浓度,降低PH值引入兆声清洗,去除超微小颗粒。使用表面活性剂,增强溶解性。加入...
在以及法规地推动下,低碳RCA技术在一些国家以及地区得到了积极的应用。欧洲一些国家早在十多年前就开始推广RCA混凝土,且通过各种激励措施促进了低碳建筑材料的使用。以英国为例相关部门鼓励建筑行业使用回收材料。为使用RCA的企业提供税收优惠。极大地促进了低碳技术的推广。在某国,低碳RCA混凝土地技术应用也日益引起关注...
基本原理:结合了RCA技术和免疫反应,通过抗原-抗体反应触发RCA。 引物使用:引物的5’端标记有抗体,与抗原-抗体反应后的复合物结合。 应用:适合在芯片上进行信号扩增,用于高灵敏度和高通量的蛋白质检测。 每种技术都有其独特的优势和应用场景,研究者可以根据实验目的和需求选择合适的方法。例如,需要高灵敏度检测时可以...
RCA滚环扩增原理示意图 CPA交叉引物扩增技术 原理:CPA是2008年由优思达公司独立研发成功的一种新的核酸恒温扩增技术,也是中国首个具有自主知识产权的核酸扩增技术。它针对目的基因4或5个区域设计4或者5条特异性引物,利用具有链置换特性的Bst DNA聚合酶、甜菜碱,在63 ℃左右条件下进行高效、快速、高特异地扩增靶序列。
RCA工艺技术在无线电通信领域具有重要的地位。在无线电通讯领域,RCA工艺技术的应用非常广泛。首先,RCA工艺技术为无线电通讯设备的研发和制造提供了支持。无线电通讯设备包括收音机、电视机、无线电报机、无线电电话等。RCA工艺技术的应用,使得这些设备能够更加稳定和高效地工作,提高了设备的性能和品质。其次,RCA工艺技术还...