RAW264.7细胞株诱导处理 诱导操作及注意事项 1. 使用37℃预热的破骨诱导分化培养基(货号:CCTCC-Y005)重悬细胞,按照5000~20000 cells/cm2密度进行铺板,48孔板培养基体积建议400-500μL。 2.细胞每隔1d全量换液一次,每次换液前破骨诱导分化培养基应37℃预热 3. 诱导分化4-10天,可观察到成熟的多核破骨细胞。
采用RAW264.7细胞系进行破骨细胞培养需要添加适当的细胞因子来诱导其分化为功能成熟的破骨细胞。使用RAW264.7细胞系诱导法的关键步骤: 1. 细胞的预处理:将RAW264.7细胞系培养至合适的浓度,将细胞接种于培养皿中,培养至细胞充分附着并达到80%以上的密度。 2. 细胞的诱导与刺激:将培养基中的血清浓度减少至1%以下,添加...
目的:通过改良细胞培养方案建立体外诱导Raw264.7细胞分化形成成熟破骨细胞(OC)的高效培养体系。方法:向Raw264.7细胞培养液α-MEM中添加50μg·L-1 M-CSF、100μg·L-1 RANKL和1×10-8 mol·L-1 1α,25-(OH)2D3,于5%CO2、37℃孵箱中培养12d,每3d换液1次,每次换液前对细胞进行短暂消化。倒置显微镜下...
4期ChinJStomatol,April2015,Vol.50,No.4·235··口腔组织病理学研究·绿色荧光蛋白标记的Raw264.7体外诱导分化为破骨细胞的实验研究裴瑛波吕春阳刘浩【摘要】目的观察增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)标记的Raw264.7体外分化为破骨细胞的能力,拟为EGFP基因作标志物对外源性破骨前体细胞进行体内...
本研究结果表明,盐肤木果实对 (Receptor Activator of Nuclear Factor-κB Ligand, RANKL) 诱导的 RAW264.7 细胞向破骨细胞分化具有一定的预防作用,其作用可能涉及多靶点和多途径。在已鉴定出的 14 个化合物中,柠檬酸、槲皮素、杨梅素 -3-O- 半乳糖苷和槲皮素 -3-O- 鼠李糖苷可能是抑制破骨细胞生成的主要活...
提示获得的OC成熟并具有吞噬功能。结论:本实验通过改良培养方法,联合应用细胞因子50μg·L-1M-CSF、100μg·L-1RANKL和1×10-8mol·L-11α,25-(OH)2D3建立了体外诱导Raw264.7细胞分化形成成熟OC的高效培养体系。[关键词] Raw264.7细胞;破骨细胞;巨噬细胞集落刺激因子;核因子κB受体...
获取简单，纯度较高，可以无限传代，成为诱导破骨细胞的主流[3]。然而，RAW 264.7细胞生长较快，且容易分化，用RAW 264.7细胞诱导破骨细胞依然有很大的难度，国内外文献对其培养与诱导的条件有很大差异，笔者主要研究RAW 264.7细胞向破骨细胞诱导分化的适宜条件，为后续研究破骨细胞的功能奠定基础。
目的:观察葛根素对RAW264.7细胞破骨分化能力的影响,探究Notch信号通路在其中的调控作用。 方法:将RAW264.7细胞分5组干预培养:对照组加入DMEM高糖培养基;破骨诱导组加入破骨诱导培养基(含巨噬细胞集落刺激因子与核因子κB受体活化因子配体的DMEM高糖培养基);低、中、高浓度葛根素组分别加入含10,25,50 µmol/L葛根...
方法 RANKL诱导RAW264.7细胞6d后,用抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP) 染色法观察TRAP阳性多核细胞,吖啶橙染色激光共聚焦显微镜 (LCSM)观察多核细胞形态;诱导RAW264.7细胞9d后,RT—PCR检测RAW264.7细胞的破骨细胞表型和功能基因表达及其 RANKL诱导后变化;诱导RAW264.7细胞12d后,钙磷覆盖的破骨细胞活性分析板观察破骨细胞 ...
5、TH-PL对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响 正常组RAW 264.7培养5 d后进行TRAP染色,可见大小相对均一的单核巨噬细胞,而经50 ng/mL的RANKL诱导RAW 264.7细胞5 d后可见大量TRAP阳性的多核细胞(核不少于3 个),细胞体积明显增大,表示在此条件下破骨细胞模型建立成功。与模型组相比,随着TH-PL质量浓度的升高,破...