作者首先采用实验室前期开发的检测DNA双链断裂的高通量测序方法——PEM-seq3进行定量分析(胡家志课题组开发出优化基因编辑和追踪DNA修复的新方法),发现RAD21缺失将导致全基因组的DNA断裂水平提高至原来的3-5倍(图1c)。这说明黏连蛋白在维持基因组稳定性方面发挥着极为重要的作用。 图1 RAD21降解造成大量基因组
这些结果暗示这4个基因的功能可能是不同的。 免疫荧光定位分析表明,OsRad21-1和OsRad21-3特异地定位于有丝分裂的染色体上,其分布动态表明这两个蛋白可能都参与了有丝分裂姊妹染色体之间的黏着。由于水稻四个RAD21/REC8类基因中,只有OsRAD21-3在花粉发育过程中表达,同时水稻花粉的发育成熟要经过两次有丝分裂,推测...