然而,CRISPR/Cas12a系统识别灵敏度较低,需对样品中的微量病原核酸扩增后再进行识别。由于Cas蛋白在高于45℃条件下会损伤其核酸酶活性,且RAA技术要求在37-42摄氏度条件下恒温反应。因此,RAA技术与CRISPR/Cas系统具备天然的结合联用条件。 ...
一种基于RAA-CRISPR-Cas12a体系检测两种利什曼原虫的方法.pdf,本发明公开了一种基于RAA‑CRISPR‑Cas12a体系检测两种利什曼原虫的方法,属于医学检测技术领域。该方法设计针对利什曼原虫HGPRT基因的特异性RAA引物,对目标片段进行扩增,特异性的crRNA和Cas12a识别目标片
本研究开发了一种基于RAA-CRISPR Cas12a快速检测PPRV的方法,该方法设计了针对PPRV-N(核衣壳蛋白)和PPRV-M(基质蛋白)片段的CRISPR RNA和RAA引物。通过筛选和优化构建了反应体系,该方法在37℃下50min内即可完成检测。对携带PPRV N和M...
RAA-Cas12 a-Tg system was able to detect T.gondii successfully in nearly an hour at body tem-perature and was more sensitive than the routine PCR assay.The sensitivity of this system reached as low as 1 fM with high specificity.Thus,RAA-Cas12 a-Tg system provided a rapid,sensitive and...
基于RAA-CRISPR/Cas12a技术可视化检测玉米褪绿斑驳病毒的方法.pdf,本发明公开了基于RAA‑CRISPR/Cas12a技术可视化检测玉米褪绿斑驳病毒的方法、试剂盒及其应用。该试剂盒包括RAA引物对、ssDNA探针、crRNA和Cas12a蛋白,所述RAA引物对由MCMV‑F1引物和MCMV‑R3引物组成
1.一种基于raa-crispr/cas12a的猴痘病毒核酸检测方法,其特征在于,包括以下步骤: 2.根据权利要求1所述的基于raa-crispr/cas12a的猴痘病毒核酸检测方法,其特征在于,步骤2中,crrna的序列选自seq id no.11-15中任一序列,其中: 3.根据权利要求1所述的基于raa-crispr/cas12a的猴痘病毒核酸检测方法,其特征在于,步骤2...
本发明属于医学检测,尤其涉及一种基于raa-crispr-cas12a体系检测两种利什曼原虫的方法。 背景技术: 1、利什曼原虫属于动基体目,锥体科,利什曼属。生活史有前鞭毛体和无鞭毛体两个时期。前鞭毛体寄生于白蛉消化道内,当白蛉刺叮人或动物吸血时,前鞭毛体即随白蛉唾液进入人或动物体内,引起利什曼病(leishmaniasis)。该病...
Our verification indicated that RAA-Cas12a-Tg system has merits in the aspect of conveniency and sensitivity, and its applications may facilitate the control of toxoplasmosis in humans and animals. Figure 1. Schematic diagram of the application of the RAA-Cas12a-Tg detection system to environmental...
方法:建立了RAA联合CRISPR/Cas12a检测弓形虫DNA的方法,在RAA引物和检测位点上进行优化,运用优化后的系统对质粒标准品和弓形虫速殖子DNA进行灵敏度测试,选取了RH,Pru,wh3,wh6四种弓形虫毒株的基因组DNA进行检测,并对与弓形虫习性相近的原虫进行特异性评估.为了验证此方法的应用价值,我们建立了弓形虫感染小鼠模型,感染...
近期,南方科技大学的研究人员开发了一种双CRISPR/Cas12a辅助的逆转录-重组酶介导扩增(RT-RAA)检测方法和“样本进-结果出”的离心微流控平台,该平台可在30min内自动检测1拷贝/μL的新冠病毒(SARS-CoV-2),具有一步、自动化、快速和灵敏的优点,在临床诊断和疾病预防方面具有重大潜力。相关研究成果以“Dual-CRISPR/...