于是本司机得到的结论是:我们实验室的那台Nanodrop一定是内置了贤者之石(雾——) 还是去隔壁借用一下Qubit吧。 其实是这样的,对于任何仪器分析,我们都应该去理解其检出限和定量限。Nanodrop标称的检出限是2 ng/µl(双链DNA),然而定量限则远高于此。其他的Nanodrop用户也有类似的体验,曾经在ResearchGate上看到说,...
Nanodrop标称的检出限是2 ng/µl(双链DNA),然而定量限则远高于此。其他的Nanodrop用户也有类似的体验,曾经在ResearchGate上看到说,低于50 ng/µl的话就容易测不准,变异度会增大。以下同样是来自Qubit的官方数据。当DNA的浓度低于某个程度时,紫外吸收法的偏差和变异度就突破天际了。 (图5:Qubit与紫外吸收法测...
赛默飞Nanodrop vs. Qubit-科邦实验室 超微量核酸蛋白测定仪-Nanodrop vs. Qubit 凡是需要做分子生物学实验的lab，肯定逃不了要买一台核酸定量的机器。目前最为流行的仪器是Nanodrop，只需滴加一两微升的样品，按一下按钮，利用核酸的紫外吸收特性，即可得到浓度数据。近几年，以Qubit为代表的基于特异荧光染料法的...
Nanodrop标称的检出限是2ng/μl(双链DNA),然而定量限则远高于此。其他的Nanodrop用户也有类似的体验,曾经在ResearchGate上看到说,低于50ng/μl的话就容易测不准,变异度会增大。 以下同样是来自Qubit的官方数据,当DNA的浓度低于2ng/μl 时,紫外吸收法的偏差和变异度就突破天际了;当DNA浓度低于10ng/μl 时,紫外...
Nanodrop 检测方法原理为核酸、核苷酸及其衍生物都具有共轭双键系统,能吸收紫外光,RNA和DNA的紫外吸收峰在260nm波长处。一般在260nm波长下,每1ml含1μg RNA溶液的光吸收值为0.022~0.024,每1ml含1μg DNA溶液的光吸收值约为0.020,故测定未知浓度RNA或DNA溶液在260nm的光吸收值即可计算出其中核酸的含量。此法操作...
nanodrop是基于吸光值来计算核酸浓度，当核酸里面有污染时，浓度就会相差很大。比如：我送的DNA里面有RNA污染，用nanodrop测序浓度是都是500ng/ul以上，但是使用 Qubit测定后，浓度低到10以下。nanodrop对于低于20ng/ul的样品浓度测定非常不准确。常见的切胶回收的浓度非常低，nanodrop测定的一般不可靠。在...
首先我们需要来理解两台仪器在核酸定量原理上的区别。正如方才所言,Nanodrop利用了核酸的紫外吸收特性。 Nanodrop 检测方法原理为核酸、核苷酸及其衍生物都具有共轭双键系统,能吸收紫外光,RNA和DNA的紫外吸收峰在260nm波长处。一般在260nm波长下,每1ml含1μg RNA溶液的光吸收值为0.022~0.024,每1ml含1μg DNA溶液的...
首先我们需要来理解两台仪器在核酸定量原理上的区别。正如方才所言,Nanodrop利用了核酸的紫外吸收特性。 图1. Nanodrop全家福 核酸,包括DNA和RNA,均由核糖、磷酸基以及碱基构成。其中,由于碱基含有芳香环结构,因此具有紫外吸收的特性。核酸的特征吸收波长为260 nm,根据朗伯比尔定律,已知物质的消光系数(几十年前早已测量...
没有主峰可能是本身浓度就不高，比值超过2.0，应该是DNA发生降解，有杂质比值不正常时，nanodrop测出的...
Green DNA assay is the most established assay and the most general-purpose (http://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/PicoGreen-dsDNA-protocol.pdf). It requires the dilution of the standard DNA and buffer but can be adapted for use with either cuvettes, microplates, or the NanoDrop ...