本文将详细介绍qRT-PCR的操作流程。 1. 实验前准备 在进行qRT-PCR实验之前,需要准备以下材料和设备: - RNA样本:提取需要研究的组织或细胞中的总RNA。 - 逆转录试剂盒:包括逆转录酶、随机引物、dNTPs等。 - PCR试剂盒:包括聚合酶、引物、dNTPs等。 - qRT-PCR仪器:包括逆转录仪和实时荧光定量PCR仪。 - 实验...
qRT-PCR实验操作流程
以下是qRT-PCR操作流程的技术要点: 1. RNA提取 选择合适的组织或细胞样本,并使用适当的方法提取总RNA。 确保RNA的质量和完整性,可以通过琼脂糖凝胶电泳或NanoDrop分光光度计进行检测。 避免RNA降解,操作过程中应尽量减少RNA酶的污染。 2. cDNA合成 使用逆转录酶将RNA逆转录为cDNA。 选择合适的逆转录引物,可以是...