实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)/qRT-PCR,是指在PCR反应体系中加入荧光标记物,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析的方法。一般用于mRNA转录水平的定量研究、不同样本或基因组中DNA拷贝数的测定、基因芯片结果验证、药效分析等。 Q: qRT-PCR检测对样品有何要求?
实时荧光定量PCR(qRT-PCR)是分子实验室家喻户晓的基因表达定量技术。无论是刚入实验室的菜鸟,还是久经沙场的老手,都需要时不时用一下这个高大上的技术来进行转基因的检测、突变体的鉴定、组织表达的定量或标记基因的表达。对于大多数老手而言,qRT-PCR不过是配一板PCR体系丢到机器里去,静等两个小时结果出来的一个...
qRT-PCR 原理 从PCR到qPCR qPCR原理 Taqman探针:探针两端分别接荧光基团与 荧光淬灭基团,PCR 中Taq酶切开探针,分离 荧光标记 荧光基团,使之荧光不被淬灭 染料荧光:SYBR染料,结合DNA双螺旋大 沟发荧光,与单链不结合 扩增产物的荧光信号达到设定的荧光阈值时的所对应的扩增循环数 Ct值 (Cycle Threshold )。C代表...
实时荧光定量PCR(qRT-PCR)是分子实验室家喻户晓的基因表达定量技术。无论是刚入实验室的菜鸟,还是久经沙场的老手,都需要时不时用一下这个高大上的技术来进行转基因的检测、突变体的鉴定、组织表达的定量或标记基因的表达。对于大多数老手而言,qRT-PCR不过是配一板PCR体系丢到机器里去,静等两个小时结果出来的一个...
对于大多数老手而言,qRT-PCR不过是配一板PCR体系丢到机器里去,静等两个小时结果出来的一个小实验。然而对于刚进实验室不久的生物小白们,花了两周时间从各大平台和课本中好不容易掌握了SYBR Green的发光原理、Ct值的定义、甚至可以根据ΔΔCt公式手算定量结果,真正开展实验时,却发现自己面对的唯有一机器、一酶、...
实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)/qRT-PCR,是指在PCR反应体系中加入荧光标记物,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析的方法。一般用于mRNA转录水平的定量研究、不同样本或基因组中DNA拷贝数的测定、基因芯片结果验证、药效分析等。