① Real-Time PCR = quantitative PCR (qPCR) = quantitative Real-time PCR (qRT-PCR)，实时定量PCR...
🔬实验步骤: 样本采集与处理:确保RNA的完整性。 RNA提取:严格按照试剂盒操作。 反转录:合成cDNA。 配置qRT-PCR反应体系:加入引物等。 扩增反应:设置合适的程序,上机进行扩增。📊数据分析: 软件选择:使用合适的软件(如Bio-Rad CFX Manager等)。 Ct值分析:通过相对定量(如2⁻ΔΔCt法)计算基因表达差异。📚...
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原理qRT-PCR 从PCR到qPCR qPCR原理 荧光标记 Ct值 Taqman探针:探针两端分别接荧光基团 与荧光淬灭基团,PCR中Taq酶切开探针, 分离荧光基团,使之荧光不被淬灭 染料荧光:SYBR染料,结合DNA双螺旋大 沟发荧光,与单链不结合 扩增产物的荧光信号达到设定的荧光阈值时的所对应的扩增循环数 (Cycle Threshold)。C代表Cycle,...
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2 qRT-PCR计算mRNA相对表达量计算 可以根据如下格式排列自己的数据,然后根据不同颜色的指引,进行△Ct,△△Ct,2^-△Ct的计算,最后得出mRNA的相对表达量(已经非常详细了,能看懂了吧,对于初学者,文末会将excel上传,大家可以跟着模拟学习,其它数据一般来说是触类旁通!!!)。
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安捷伦高特异性 miRNA QRT-PCR 检测试剂盒为总 RNA 中 microRNA (miRNA) 的多聚腺苷酸化以及由这些加尾 miRNA 合成的第一链 cDNA 提供了合格的试剂(图 1),另外还提供了一种新型 PCR 酶制剂和 QPCR 检测试剂,旨在为 miRNA QPCR 检测提供最高特异性。试剂盒包括两个模块,一是 miRNA 在 3’ 端的多聚腺苷...