病因分析:qRT-PCR(实时定量反转录聚合酶链反应)是一种分子生物学技术,用于检测特定RNA分子(如mRNA)的表达水平。这种技术在许多疾病的病因分析中都有应用,例如病毒感染、癌症、遗传病等。通过qRT-PCR检测,可以了解病人体内特定基因的表达情况,从而分析病因。 治疗建议:对于治疗,qRT-PCR检测的结果可以为医生提供重要的参...
(4)qRT-PCR 反应:设计并合成引物,随后以 cDNA 为模板,使用细胞炎性因子的特异性引物进行 qRT-PCR 扩增反应。反应完成后,确认扩增曲线和融解曲线,对标准曲线进行分析。(5)数据分析:使用 qRT-PCR 仪检测荧光信号,导出 Ct 值,以β-actin 作为内参基因,采用 2-△△CT 法来计算细胞炎性因子的表达水平。 注意...
qRT-PCR(Quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术已成为国际公认的核酸分子定量的标准方法,能够专一、灵敏、快速、高重复的精确定量起始模板的浓度,可用于miRNA、mRNA、lncRNA、circRNA及DNA等分子定量检测。 mRNA在生物体内表达量较低,一般难以检测,却参...
qRT-PCR,是Quantitative Real-time PCR 的简称,也叫实时荧光定量PCR,是⼀种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测定每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物的总量,通过内参或者外参法对待测样品中特定DNA序列进⾏定量分析的⽅法。 qRT-PCR⽬前已成为不同样本间进⾏基因表达⽔平差异⽐较权威的⽅法。
通过实时检测PCR扩增过程中荧光信号的变化,可以获得关于相对定量基因表达水平的信息。qRT-PCR一般包括SYBR染料法和Taqman探针法。例如,SYBR染料游离时发出的荧光信号微乎其微,但当其与双链DNA的小沟结合后,荧光信号强度会大大增加,表明双链DNA总量也发生了很大变化。在qRT-PCR实验中,Ct值表示每个反应管内的荧光信号...
以基因的cDNA为模板进行PCR扩增,在PCR扩增过程中,通过收集荧光信号,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct 值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以可以定量。 Ct值是什么意思呢? Ct 值的含义是:每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数 (cycle)。 qRT-PCR在扩增的时候都会有...
qRT-PCR(Real-Time Quantitative Reverse Tranion PCR),即反转录实时定量PCR,结合了PCR与RT-PCR,是一种应用广泛的研究基因表达模式的方法,这种方法主要的优点是范围宽、敏感性高、精确度高,无PCR后处理步骤等。 用途 病原体检测:检测和定量病原体(病毒、细菌等),例如在临床试验中可以用qRT-PCR检测病毒感染。
转录组测序(RNA-seq)将细胞内某一类型(或全部)的RNA逆转录成DNA,通过高通量测序的方法测定其序列并统计其表达水平的一项技术。是检测基因表达变化的通用方法。qRT-PCR 是指通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。
目前,行业内对于慢病毒物理滴度的检测,通常采用ELISA检测法和qPCR法结合使用,以提高检测结果的可靠性。为此,翌圣生物自主研发了HIV-1 p24 ELISA Kit和慢病毒物理滴度qPCR检测试剂盒。 其中,qPCR法的检测试剂盒采用探针法荧光定量PCR原理,可专一快速的检测慢病毒RNA,线性范围最宽可达5copies/μL~5×108copies/μL,...