C代表Cycle，T代表Threshold。简单讲，Ct值就是qPCR中起始模板扩增达到一定产物量时，所对应的循环数。所...
起始模板量浓度越高,Ct值越小;起始模板量浓度越低,Ct值越大。 qPCR实验中通常还会遇到复孔间重复性差的情况,一般有以下两种: CT值很大,如CT≥30,重复性差属于正常现象。该现象符合泊松分布,即在有效模板量很少的情况下,模板与引物的碰撞存在随机性,直接导致复孔间的CT值差异较大。解决方法为如果融解曲线没有...
1%琼脂糖,6V/cm,15min,上样1-3ul RNA纯度高≠完整性好 上图第6、7、8样品OD260/280分别是1.99、2.0和1.89。但下图电泳结果显示实际上第6、7、8样品RNA已经降解了。此时用降解的RNA跑qPCR就很可能会出现内参的Ct偏高。 核酸电泳就用WIX水平电泳仪 ...
然而qPCR反应并不是一直处于理想情况下,当扩增产物量达到“一定产物量”时,此时循环个数为Ct值,处于指数扩增时期。 Ct值与起始模板量的关系 :模板的Ct值与该模板的 起始拷贝数的对数存在线性关系 。起始模板量浓度越高,Ct值越小;起始模板量浓度越低,Ct值越大。2.扩增曲线、荧光阈值与一定产物量 qPCR扩增产物量...
溶解曲线都是80摄氏度以后的单峰，内参基因和目的基因的CT值都在30左右了。不知道是那里出了问题。求...
在居家办公之前,内参MPPIA的Ct值有18-19左右,target gene大概26-28左右,都有比较好的扩增曲线和溶解曲线。但是自复工以来,同样提取得到的RNA,逆转之后跑实时PCR,内参MPPIA的Ct值都已经33以上,甚至高于35,或压根undetermined;target gene全部都是undetermined,溶解曲线根本不规则。 同样的手法,同样的Trizol提取方式,...
我提的rna是人的组织 本身会ct值比细胞高一点 提之前可以用红细胞裂解液裂一下再用pbs洗一下会好一点 赞 回复 Zen. 2023-06-17 22:21:02 重庆 我提的rna是人的组织 本身会ct值比细胞高一点 提之前可以用红细胞裂解液裂一下再用pbs洗一下会好 ... 虚空momo 🤝好的,谢谢分享经验 赞 回复 你...
生命科学家在无数次的实验验证后,给新冠病毒核酸的数量设定了一个阈值,达到这个阈值线经过的复制循环越少,就代表检测样品里的病毒含量越高。也就是说,如果一个人的样本才进行了十几个循环就达到了阈值线,那么这个人就是当之无愧的“毒王”了。 达到阈值线经过的循环数就是CT值。由于CT值与病毒核酸的含量呈反比...
Qpcr检测文献报道的某细胞里某基因mRNA水平,但是做出来Ct值较高35及以上以致复孔差异大无法统计,但是跑胶显示p出了目的条带只是条带较弱,怎么可以降低Ct值?cDNA未做稀释,且反转用的模板量已经2ug了,引物特异性也挺好的,是直接引用比较权威的杂志当中的引物。还有什么办法可以优化一下? 返回小木虫查看更多分享...