ΔCt(对照)=Ct(对照-IL-6)-Ct(对照-GAPDH)=30.1-16.2=13.9 ΔCt(实验)=Ct(实验-IL-6)-Ct(实验-GAPDH)=24.3-16.4=7.9 第一步的校正就完成了,也就是第一组的ΔCt值就有了。 2.2 计算ΔΔCt ΔΔCt=ΔCt(实验)-ΔCt(对照)=7.9-13.9=-6 这样ΔΔCt就有了,你可能会问,为什么是ΔCt(实验)-Δ...
1.ΔCt值的计算公式 ΔCt值= Ct(目标基因)- Ct(参考基因) 其中,Ct值(Cycle threshold)是指在PCR反应中,荧光信号到达阈值的反应循环数。参考基因通常是一种稳定的内参基因,用于校正不同样品之间的PCR变异。 2. 2^(-ΔΔCt)的计算公式 2^(-ΔΔCt) = 2^(-(Ct目标基因- Ct参考基因) - (Ct样品A- ...
例如这里的Control组Ct值是:13.38、13.60和15.80时,我们选择用几何平均值: 4. 计算ΔΔCt值。用每个样品所得的ΔCt减去第三步的平均ΔCt。 5. 计算 2^-(∆∆Ct)值,即为每个基因的相对表达量 最后在统计分析的时候,直接使用2^-(∆∆Ct)值进行分析可能不会呈现正态分布且偏态严重,这时候可以用log公...
QPCR必备5|数据分析|CT值|扩增曲线|溶解曲线|特异性扩增|TM值| 1329 0 06:16 App qPCR原始数据处理模板-Excel(自用) 7313 0 03:09 App 2-△△ct法进行qRT-PCR数据分析 18.1万 141 04:09 App 【研究生】 Graphpad Prism画分组柱状图 | qPCR(RT-PCR)数据处理方法 4.7万 6 02:13 App qPCR原始数据分析...
Ct值是实时定量PCR放大到指定阈值的周期数。ΔCt法通过计算目标基因Ct值与参考基因Ct值之间的差异来比较基因表达量。公式如下: ΔCt = Ct (目标基因) – Ct (参考基因) - 2^-ΔΔCt法 ΔΔCt法是一种更精确的相对定量方法,它通过计算目标基因与参考基因的ΔCt值差异来比较基因表达量。公式如下: ΔΔCt ...
其计算公式为:ΔCT = CT(target gene) - CT(reference gene),ΔΔCT =ΔCT(target sample) -ΔCT(control sample)。这种方法首先使用内参基因进行校准,然后计算样品与对照组间的差异,从而得到目的基因相对于内参基因的表达趋势。 在具体操作中,首先需要设计引物和探针,然后进行PCR扩增,得到CT值。接着,根据目的...
这个qPCR计算2^-△△Ct是万能模板,如下是计算每个样本目的基因的🔺CT(看箭头的公式): 接着是用POWER函数计算每个样本目的基因的2-🔺CT(看箭头的公式): 再计算对照组的平均值2-🔺CT: 最后用每个样本的2-🔺CT除以对照组的平均值2-🔺CT...
实时荧光定量PCR,RT-qPCR数据处理傻瓜式教程(2-△△Ct 法)ABI CT值和罗氏cp值都适用 39.5万 541 15:25 App 实验员小哈&实验系列 - 第十集 - RT-PCR (qPCR) 12.6万 86 13:39 App Q-PCR数据处理 1835 0 03:31 App 3分钟学会荧光定量PCR统计方法 1.3万 7 51:07 App 【实验指南】荧光定量2-△△ct...
qPCR的相对定量计算方式，即2–∆∆Ct方法，由Kenneth Livak和Thomas Schmittgen于2001年提出并广泛应用。此方法在实时荧光定量PCR（qPCR）实验中，用于计算样品中特定基因相对于参考基因的相对表达量。荧光定量PCR实验中，仪器会根据扩增产物的荧光信号达到设定阈值的循环数来记录Ct值。Ct值的高低...
重复实验对于解释样本间的变化很重要,以确保数据是可靠和稳健的。至少应进行2次重复实验,重复之间的差异应较低。为了确保变异是可接受的低水平,计算变异系数(%Cv=(标准偏差(重复)/平均CT(重复))x100)。这一点应该始终低于3%。 步骤四 结果分析:获取到可信的C...