通过上述的推导,这里具体计算就很简单了。下面利用GraphPad进行绘图,这里有两种策略:策略一:在Excel中使用函数=STDEV()先行计算标准误差,然后利用Mean+SD进行绘图。 策略二:直接使用全部(-△△Ct)值进行计算。 可以看到,两种方法最后结果是一致的。最后需要明确的是:Ct值的范围为15-35时为有效的。Ct值小于15,认为...
为了比较样品间变化,计算了96个样本的平均±SD,如果通过原始C T值计算,平均±SD是20.00±0.193,CV为0.971%。但是如果把原始Ct值用2 -CT转化成线性形式,平均±SD是9.08 × 10 -7 ±1.33 × 10 -7,CV为13.5%。从这个简单的例子我们可以看出,通过原始CT值来反映变化是错误的,应该避免。用2 -CT将单个数据...
通过上述的推导,这里具体计算就很简单了。下面利用GraphPad进行绘图,这里有两种策略:策略一:在Excel中使用函数=STDEV()先行计算标准误差,然后利用Mean+SD进行绘图。 策略二:直接使用全部(-△△Ct)值进行计算。 可以看到,两种方法最后结果是一致的。最后需要明确的是:Ct值的范围为15-35时为有效的。Ct值小于15,认为...
平均 SD , CV 由每一个时间点所取的三个重复样求得。用这种分析方法,在 0 时刻的平均倍数变化接近于 1 。我们发现通过检测在 0 时刻平均倍数变化是否为 1 可以很方便的验证三个重复样品之间是否有错误或者误差。如果得到的结果与 1 偏差很大 , 则表明存在计算错误或者是很高的实验误差。 在前面的例子中,在...
绝对定量通过标准曲线计算起始模板的拷贝数;相对定量方法则是比较经过处理的样品和未经处理的样品目标转录本之间的表达差异。2-△△CT方法是实时定量PCR实验中分析基因表达相对变化的一种简便方法,即相对定量的一种简便方法。本文介绍了该方法的推导,假设及其应用。另外,在本文中我们还介绍了两种2-△△CT衍生方法的推导...
通过上述的推导,这里具体计算就很简单了。下面利用GraphPad进行绘图,这里有两种策略:策略一:在Excel中使用函数=STDEV()先行计算标准误差,然后利用Mean+SD进行绘图。 策略二:直接使用全部(-△△Ct)值进行计算。 可以看到,两种方法最后结果是一致的。最后需要明确的是:Ct值的范围为15-35时为有效的。Ct值小于15,认为...