qPCR,即荧光定量PCR是利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增中每一个循环扩增产物量的变化,并进行定量分析。我们通常做的常规PCR只是关注PCR最后扩增的产物,通过电泳进行判断,产物是否发生扩增,即我们的模板中是否存在我们待检测的目标基因。而qPCR是期望对PCR反应过程的每一步都能进行监测,而不只是关注PCR最终的扩增结果。...
通过QPCR可以准确快速地检测和定量目标核酸分子的存在和数量,广泛应用于基因表达分析、病原体检测、遗传性疾病诊断等领域。 QPCR是在传统PCR技术的基础上发展而来的。传统PCR是通过反复扩增目标DNA片段,而QPCR则在PCR的同时实时测量扩增产物的含量。通过实时监测PCR反应中目标DNA结合荧光探针的情况,可以根据荧光信号的变化...
生物分析部RT-PCR/qPCR技术分析临床siRNA药物的典型案例 药明康德生物分析部对siRNA检测主要采用以茎环法为基础的RT-qPCR/qPCR方法,方法采用一个特异性的茎环引物与siRNA双链中的反义链互补杂交,通过反转录得到延长的cDNA,随后通过基于TaqMan探针法qPCR反应检测反义链的浓度。方法的验证主要是对特异性、选择性、灵敏度...
核酸检测还可以细分为基于PCR方法的核酸检测和基于测序方法的核酸检测,其中PCR方法包括单重检测和多重检测。基于测序方法的核酸检测,被大家熟知的应用就是宏基因组,由于宏基因组测序技术流程和解读的复杂性,业界对该技术的临床适应症、实验流程、质量管理和报告解读等方面仍存在诸多困惑。近几年陆陆续续有很多关于宏基...
-qPCR在食品安全中的应用:-食品质量控制:通过检测食品中特定基因的存在和数量,判断食品的品质和安全状况。-食品真实性检测:通过检测食品中的特定基因或DNA序列,鉴定食品的真实性和来源。-食品中污染物的检测:通过检测食品中的污染物的DNA或RNA,进行快速、灵敏的检测,以保障食品安全。 -qPCR在生态环境研究中的应用:-...
由于其高灵敏度、高准确性和快速分析能力,qPCR广泛应用于基因表达分析、疾病诊断、细菌检测等领域。 二、 qPCR的原理是通过PCR反应扩增目标DNA序列,并利用荧光探针或SYBR Green等荧光染料实时监测PCR反应的过程。qPCR分为两种常用的检测方法:荧光探针法和SYBR Green法。 2.1 在荧光探针法中,PCR反应体系中有一对互补的...
qpcr原理及应用 qPCR原理及应用。 qPCR全称quantitative real-time polymerase chain reaction,是一种用于测量DNA或RNA分子数量的技术。它结合了PCR技术和荧光探针技术,能够在PCR反应过程中实时检测目标分子的数量,具有高灵敏度、高特异性和高准确性的优点。qPCR在基因表达分析、病原微生物检测、基因突变分析等领域有着...
qPCR技术可以用于检测DNA序列上的突变,包括单核苷酸多态性(SNP)和基因拷贝数变异。通过检测特定的突变位点,可以快速、准确地识别某些疾病相关基因的突变情况。 2.3 qPCR技术在微生物学领域有重要应用,可以检测和鉴定细菌、病毒、真菌等微生物。通过设计特异性引物,可以对目标微生物的DNA序列进行扩增和检测,实现快速、准确...
qPCR应用: 1.基因表达研究:qPCR被广泛应用于基因表达研究中,可以定量检测mRNA水平的变化。通过对目标基因和参考基因的qPCR检测,可以计算出目标基因相对于参考基因的表达量。 2.病原体检测:qPCR在临床医学中也有广泛的应用,特别是在病原体检测中。通过针对病原体的基因进行qPCR检测,可以准确、快速地诊断感染性疾病,并...