实时荧光定量PCR技术(Realtime quantitative PCR,qPCR)是在PCR反应体系中添加荧光报告基团和荧光淬灭基团,通过荧光信号来实现对核酸分子的定量检测过程。 在反应过程中,PCR产物随着扩增反应的进行不断生成,荧光信号不断增加,进而可以通过荧光信号的变化对整个PCR过程进行实时监测,并通过标准曲线对原始模板进行定量分析。 本...
QPCR是一种快速、准确、可重复的技术,可以用来检测基因表达的变化,广泛应用于基因表达调控的研究中。 1. RNA提取和反转录:首先需要从细胞或组织样品中提取总RNA,使用反转录酶将RNA转录成cDNA。RNA提取和反转录过程需要注意样品的质量和纯度,以保证实验结果的可靠性。 2.引物设计:选择合适的引物是QPCR实验的重要步骤。
近日，阅尔基因联合复旦大学附属中山医院、同济大学附属肺科医院 ，在经典的国际权威期刊《Nucleic Acids Research》(IF=16.6)发表了CCMA(Color Cycle Multiplex Amplification)超多重扩增技术¹，利用同一靶标多个扩增子之间可控的Ct延迟设计多色编码组合，单管qPCR反应即可鉴定21种常见病原体 。...
QPCR(定量PCR)是一种利用PCR技术来定量检测DNA样品中特定基因表达量的方法。它通过放大DNA片段并测定荧光素信号的强度,可以准确地计算出目标基因的表达量。与传统PCR相比,QPCR具有更高的灵敏度和准确性,能够检测到更低浓度的DNA。📈 应用领域 QPCR在生命科学领域有着广泛的应用,特别是在基因表达调控和疾病诊断方面。
Real-time RT-PCR是qPCR和RT-PCR的组合,其中的“RT”是Reverse tranion(逆转录)的意思,所以RT-qPCR就是结合了荧光定量技术的逆转录PCR,即以mRNA或总RNA为模板,先反转录得到cDNA,再以cDNA为模板,通过荧光定量PCR进行定量检测分析。因为RT-PCR只可以定性,但不能进行定量分析。
如果您运行实时荧光定量PCR (qPCR) 检测,很可能会得到一些看起来很奇怪的扩增曲线。当实验结果看起来不对劲时,就需要提高警惕并开始深究潜在原因和可能的纠正措施。 扩增图的特性可以为问题排除提供线索。首先我们回顾“正常”qPCR扩增曲线的特征,然后重点介绍一些常见的“异常”,这些异常可能需要格外注意以确保准确的结...
Real Time PCR,即实时荧光定量PCR,也被称为定量PCR或qPCR,是实时监测PCR扩增产物并进行解析的方法。 Takara以专业的精神,结合定量PCR实验的国际标准MIQE原则,综合Takara先进的研发技术、标准严谨的实验操作和丰富的技术支持经验,为您带来【定量PCR课堂】,内容包括定...
Quantitative PCR,又称为real-time PCR,是一种在DNA扩增反应中,以荧光染料或荧光标记探针侦测每次聚合酶链锁反应(PCR)循环后产物总量,并以荧光信号的形式被qPCR仪内的光学检测系统识别,最后通过绘制相关标准曲线对未知样本模板进行定量分析的方法。相比起传统的PCR,qPCR可对样本进行。
qPCR技术的区别 扩增原理：LAMP：等温扩增技术，且引物设计与扩增动力学都很复杂。qPCR：在不同温度下进行的循环性核酸扩增技术，通过荧光信号监测扩增产物的积累，实现定量分析。温度条件：LAMP：一个恒定的等温环境（通常在60-65°C），对设备要求较低。qPCR：qPCR需要多个温度循环，包括变性、退火和延伸阶段，需要...
近日,阅尔基因联合复旦大学附属中山医院、同济大学附属肺科医院在国际核酸领域顶级期刊Nucleic Acids Research(IF=16.6)发表了 CCMA(Color Cycle Multiplex Amplification)多重扩增技术,通过设计同一靶标多个扩增子之间可控的 Ct 延迟实现多色编码组合,极大提高了单管荧光定量 PCR(qPCR)反应的检测通量。理论上,仅需4个...