1、合成的干粉引物: 合成的干粉引物,浓度一般为2OD; 是以O.D.260单位来计量的。 1 O.D.260值系指在1ml体积1cm光程标准比色皿中,于260nm波长下的吸光度为1A260。 1 O.D.260 值相当于33ug的oligo (国际统一标准),而每个碱基的平均分子量一般以330道尔顿进行计算。客户可根据此数据和oligo的分子量得到摩...
qpcr提高引物的浓度,扩增效率怎么变 Ct= -k lgX0+ b(线性方程)用这个方程可以通过Ct值算出样品的起始浓度 斜率=-1/lg(1+e) 扩增效率E=1, 斜率=-3.32 扩增效率范围:90%-110% 斜率范围:-3.1和-3.59之间 △△Ct这是相对荧光定量的一个计算公式的简化形式,用于比较不同样品之间的差。
③ qPCR预混液未混合均匀 使用前应充分混匀qPCR预混液 注:重复性较为理想的扩增曲线STD<0.2 2.熔解曲线为非单一峰 这个可能的原因有以下几点: ① 非特异性扩增 可以根据设计原则设计新的引物,可通过梯度 PCR 对引物退火温度进行优化 ② 出现引物二聚体,引物为非特异性引物 引物设计不合理导致的引物二聚体在熔...
qpcr提高引物的浓度，扩增效率怎么变 Ct= -k lgX0+ b（线性方程）用这个方程可以通过Ct值算出样品的起始浓度 斜率=-1/lg(1+e) 扩增效率E=1, 斜率=-3.32 扩增效率范围：90%-110% 斜率范围：-3.1和-3.59之间 △△Ct这是相对荧光定量的一个计算公式的简化形式，用于比较不同样品之间的差。
做qPCR时，引物的最终工作浓度为多少比较合适呢？有的帖子说0.2-1uM都可以。那么是不是工作浓度为0....
可以的,想象一下WB, 这不就是提高了目的蛋白的抗体浓度 赞 回应 renexxxx 楼主 2022-10-08 21:55:41 广东 可以 我师姐说的 我的目的基因ct值也超大 乌龙茉莉奶盖- 谢谢姐妹,提高引物浓度对cq值改善如何? 赞 回应 renexxxx 楼主 2022-10-08 21:55:46 广东 可以的,想象一下WB, 这不就是提高...
需要一致，这样才可以做到定量，内参才有参考价值。如果模板和引物浓度不一致，那么就相当于不同组的实验，没法比较。
技术交流|今天发现前几天做的qpcr内参基因和目的基因的引物浓度不一样,会影响ct值吗? 来自: 奈何奈何是我 2023-03-04 20:01:17 广东 求求各位大佬解惑,不敢去问导师,怕导师一脚把我给踹了😭赞 回复 转发 赞 收藏 只看楼主 豆友260526485 2023-03-04 20:31:44 上海 [内容不可见] 赞(4) 回复 ...
qPCR产物量少该如何解决? 可能的原因: 1) RNA模板质量低或者cDNA模板质量低 2) 靶miRNA基因表达量低或者无表达,无法检测 3) 试剂中存在PCR抑制剂 4) PCR仪是否正常运转 5) PCR程序设置有无问题,如:循环数不够、无读板过程、无制作融解曲线的过程等 6) PCR过程所用试剂少加一种或多种,如,sybr、正反向引...
BioTNT 关于引物浓度的使用说明 引物primers 分为以下三种: 1、合成的干粉引物: 合成的干粉引物,浓度一般为2OD; 是以O.D.260单位来计量的。 1 O.D.260值系指在1ml体积1cm光程标准比色皿中,于260nm波长下的吸光度为1A260。 1 O.D.260 值相当于33ug的oligo (国际统一标准),而每个碱基的平均分子量一般...