操作步骤 1、从RNA(或mRNA)反转录合成cDNA第一链:2、于95℃加热5~10min,灭活反转录酶,使RNA—cDNA杂交体变性,然后迅速冰浴冷却:3、PCR扩增:方法基本同PCR。cDNA第一链合成方法:20ul反应液中含10xPCR扩增缓冲液,2ul;四种dNTP(10 mmol/L)2ul;RNA酶抑制剂20U;mRNA,l~2ug(或RNA 5-10ug...
根据MIQE(Minimum Information for Publication of Quantitative Real-Time PCR Experiments)的指导方针,qPCR为Quantitative real-time PCR的简称,RT-qPCR指的是Reverse transcription–qPCR,RT-PCR仅用来表示Reverse transcription polymerase chain reaction,而不是Real-time PCR,但是有少数作者并没有坚持这一原则。