1.CT值(Threshold Cycle,阈值循环数) QPCR仪器会给出每个样品的CT值,即扩增产物达到特定荧光阈值的循环数。 2.ΔCT计算: 计算样品基因相对于内参基因的ΔCT值: ΔCT=CT(target gene)−CT(reference gene) 3.ΔΔCT计算 再计算ΔΔCT,即实验组相对于对照组的差值: ΔΔCT=ΔCT(experimental)−Δ...
科研解忧,qPCR实..一、细胞RNA提取1.细胞或组织匀浆,约100 μL体积的样本使用1 mL Trizol溶液(重悬细胞,涡旋振荡10s,室温静置5 min,然后加入1/5体积(200 μl)的氯仿(即三氯甲烷),振荡混匀
将八联管在离心机中离心,排除气泡及贴壁液滴,再将八联管放置于仪器中 创建一个新的实验程序 选择detection format采集模式和SYBR Green I 打开Run Editor设置温度包括升降温和循环数,qPCR反应条件可以根据需求自行调整 设置完反应条件后点击Start便可以实时监控进度 按"synchronization"按钮仪器数据可以和U盘同步 再次点击...