要变性、退火、延伸3步.由于其产物长度在80-150bp 之间,所以只需要变性 和退火就可以了.SYBRGreen等染料法,最好在PCR扩增程序结束后,加 一个溶解程序,来形成溶解曲线,判断 PCR产物的特 异性扩增.而溶解程序, 仪器都有默认设置,或稍有不同,但都是一个在产物进行溶解时候, 进行荧光信 号的收集.3.仪器设置...
模板浓度是决定Ct的最主要因素。控制在一个合适范围内,使Ct在15-35之间。 反应液成分的影响 任何分子的荧光发射都受环境因素影响---比如溶液的pH值和盐浓度。 PCR反应的效率 PCR反应的效率也会影响Ct值。在PCR扩增效率低的条件下进行连续梯度稀释扩增,与PCR扩增效率高的条件下相比,可能会所产生斜率不同的标准曲线...
还是那个问题,定量PCR是高灵敏度的,再二次扩增很难排除二聚体、PCR污染、操作误差等等因素,特别是污染,我们能排除的往往都只是你想到的,还有很多是一时想不到的;如果阴性有扩增,说明PCR体系被污染了,PCR污染是很可怕的,而且很难消除。
模板浓度是决定Ct的最主要因素。控制在一个合适范围内,使Ct在15-35之间。 反应液成分的影响 任何分子的荧光发射都受环境因素影响---比如溶液的pH值和盐浓度。 PCR反应的效率 PCR反应的效率也会影响Ct值。在PCR扩增效率低的条件下进行连续梯度稀释扩增,与PCR扩增效率高的条件下相比,可能会所产生斜率不同的标准曲线...
模板浓度是决定Ct的最主要因素。控制在一个合适范围内,使Ct在15-35之间。 反应液成分的影响 任何分子的荧光发射都受环境因素影响---比如溶液的pH值和盐浓度。 PCR反应的效率 PCR反应的效率也会影响Ct值。在PCR扩增效率低的条件下进行连续梯度稀释扩增,与PCR扩增效率高的条件下相比,可能会所产生斜率不同的标准曲线...
模板浓度是决定Ct的最主要因素。控制在一个合适范围内,使Ct在15-35之间。 反应液成分的影响 任何分子的荧光发射都受环境因素影响---比如溶液的pH值和盐浓度。 PCR反应的效率 PCR反应的效率也会影响Ct值。在PCR扩增效率低的条件下进行连续梯度稀释扩增,与PCR扩增效率高的条件下相比,可能会所产生斜率不同的标准曲线...
模板浓度是决定Ct的最主要因素。控制在一个合适范围内,使Ct在15-35之间。 反应液成分的影响 任何分子的荧光发射都受环境因素影响---比如溶液的pH值和盐浓度。 PCR反应的效率 PCR反应的效率也会影响Ct值。在PCR扩增效率低的条件下进行连续梯度稀释扩增,与PCR扩增效率高的条件下相比,可能会所产生斜率不同的标准曲线...
模板浓度是决定Ct的最主要因素。控制在一个合适范围内,使Ct在15-35之间。 反应液成分的影响 任何分子的荧光发射都受环境因素影响---比如溶液的pH值和盐浓度。 PCR反应的效率 PCR反应的效率也会影响Ct值。在PCR扩增效率低的条件下进行连续梯度稀释扩增,与PCR扩增效率高的条件下相比,可能会所产生斜率不同的标准曲线...
2.影响Ct值的关键因素模板浓度模板浓度是决定Ct的最主要因素。控制在一个合适范围内,使Ct在15-35之间。反应液成分的影响任何分子的荧光发射都受环境因素影响-比如溶液的pH值和盐浓度。PCR反应的效率PCR反应的效率也会影响Ct值。在PCR扩增效率低的条件下进行连续梯度稀释扩增,与PCR扩增效率高的条件下相比,可能会所...
2.影响Ct值的关键因素模板浓度模板浓度是决定Ct的最主要因素。控制在一个合适范围内,使Ct在15-35之间。反应液成分的影响任何分子的荧光发射都受环境因素影响-比如溶液的pH值和盐浓度。PCR反应的效率PCR反应的效率也会影响Ct值。在PCR扩增效率低的条件下进行连续梯度稀释扩增,与PCR扩增效率高的条件下相比,可能会所...