5)将EP管放入磁力架,收集液体,-20℃保存。
GST pull-down实验目的是?A.体外检测蛋白质与蛋白质之间相互作用B.检测体内的蛋白质相互作用C.用于验证两个已知蛋白的相互作用D.筛选与已知蛋白相互作用的未知
GST-pull down 技术是一种在体外验证蛋白质相互作用的试验技术,可用来进一步验证酵母双杂交的结果。将靶蛋白与 GST(谷胱苷肽巯基转移酶, Glutathione-Stransferase)融合,使其与谷胱甘肽亲和树脂结合,然后在目的蛋白溶液过柱时,便可从中捕获与靶蛋白相互作用的目的蛋白,洗脱结合物后通过western blot分析,即可证实两种蛋白...
RNA pull-down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验手段之一。RNA pull-down使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过Western Blot实验检测特定的RNA结合蛋白是否与RNA相互作...
GST下拉实验原理简介 GST-pull down 技术是一种在体外验证蛋白质相互作用的试验技术,可用来进一步验证酵母双杂交的结果。将靶蛋白与 GST(谷胱苷肽巯基转移酶, Glutathione-Stransferase)融合,使其与谷胱甘肽亲和树脂结合,然后在目的蛋白溶液过柱时,便可从中捕获与靶蛋白相互作用的目的蛋白,洗脱结合物后通过western blot...
GST下拉实验原理简介 GST-pull down 技术是一种在体外验证蛋白质相互作用的试验技术,可用来进一步验证酵母双杂交的结果。将靶蛋白与 GST(谷胱苷肽巯基转移酶, Glutathione-Stransferase)融合,使其与谷胱甘肽亲和树脂结合,然后在目的蛋白溶液过柱时,便可从中捕获与靶蛋白相互作用的目的蛋白,洗脱结合物后通过western blot...
GST-pull-down: 利用GST融合蛋白沉降技术,将靶蛋白与GST标签蛋白在细菌体内进行融合表达,纯化获取融合表达蛋白。其原理是:靶蛋白-GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,作为与目的反比亲和的支撑物,充当诱饵蛋白,目的蛋白溶液裹住纯化,即可捕获与之相互作用的俘获蛋白,洗脱结合物,通过SDS-page电泳分析,或联用WB和MS...