co-IP研究的是体内自然状态下的蛋白质互作,反应地是比较真实的蛋白质之间的相互作用,而pull down则是通过体外实验,无法得知体内真实的结合情况。 co-IP由于沉淀下来的是蛋白复合物,所以不能显示蛋白质之间的相互作用是直接还是间接的,而pull down可以确定目的蛋白和检测蛋白是否可以发生直接相互作用。 五、RNA结合蛋白...
Co-IP和GST pull-down实验都是通过一种多组分的固相复合物将诱饵蛋白固定,随后富集靶标蛋白,从而确定靶标蛋白和诱饵蛋白互相作用的事实,整体思路是很类似的。不过由于固定诱饵蛋白的方法不同,二者在适用范围及实验难度上均有差异。 Co-IP 反映的是两个蛋白在体内或细胞水平的相互作用,因为在进行CoIP检测时,样本一般...
由于Pull-down实验条件是体外状态而非体内自然状态，无法得知体内真实的蛋白结合情况，因而可能会使实验结果出现假阳性，例如可能是因为电荷作用的影响造成的吸附而不是生理性的相互作用。同时，Pull-down也可以对Co-IP实验鉴定到的蛋白相互作用关系做进一步验证。若将Co-IP/Pull-down技术与以LC-MS为基础的蛋白质组学...
CO-IP和Pull Down方法是常用的蛋白质相互作用研究方法，各自具有优劣势和适用范围。选择合适的方法取决于研究的目的和需求。在实际应用中，可以根据具体情况选择使用CO-IP或Pull Down方法，或者结合两种方法的优势进行综合分析，以获得更全面的蛋白质相互作用信息。Pull Down方法则更适用于筛选潜在的相互作用伙伴，发现新...
蛋白质是生物体内重要的功能分子,其结构决定了其功能。因此,了解蛋白质的结构对于理解其功能和参与的生物过程至关重要。在生物药物研究领域,科学家们经常使用不同的方法来解析蛋白质的结构。其中,CO-IP和Pull Down是两种常用的方法,本文将对这两种方法进行比较,探讨其在蛋白结构鉴定中的应用。
Pull-down (表1)和Co-IP (表2)所用的试剂配方如下。 4 仪器设备 超声波细胞粉碎机(JY92-IIN, 宁波新芝生物科技股份有限公司)为Pull-down技术专用; 控温摇床、微量分光光度计(Nano-300)、微量离心机、台式离心机、水浴锅、静音混合...
●IP、Co-IP、pull-down:都有什么区别?如何进行选择? ●IP,Co-IP 实验的流程是固定的吗?是否可以调整? ●input,output,pre-clear,阳性对照,阴性对照,「行话」如何理解? ●抗体提前选经过 IP 验证的抗体,减少假阳性概率。 ●抗体结合蛋白 P...
CO-IP和Pull Down方法在蛋白质相互作用研究中都具有重要的应用价值,但在某些方面存在差异。 1.特异性:CO-IP方法通过特异性抗体选择性地富集目标蛋白及其相互作用的蛋白,具有较高的特异性。而Pull Down方法则通过亲和剂选择性地富集目标蛋白及其相互作用的蛋白,特异性相对较低。 2.操作难度:CO-IP方法需要特异性抗体...
pull-down 和co-IP的区别如下：区别一：Co-IP作用：Co-IP，证明两个蛋白在胞内有相互作用，但是这个作用可以是直接相互作用，也可以是形成复合物后的间接相互作用。区别二：pull-down作用：pull-down，胞外纯化蛋白后证明两个蛋白之间有相互作用，这个相互作用必然是直接相互作用。区别三：Co-IP，in ...
是处于天然构象状态的抗原（蛋白样品）和抗体之间的反应。Pull-down与Co-IP的不同之处在于其利用1个纯化且含有标签的蛋白作为诱饵来结合互作蛋白，通常用来证明蛋白之间直接的相互作用。Co-IP则采用固定的抗体捕获互作蛋白，用来证明两个蛋白之间的相互作用，但是不排除通过第三个蛋白介导的间接互作。