此外,通过使用抗AIB1和抗NICD抗体的Co-IP分析,也可以在CT26细胞中检测到内源性AIB1和NICD的相互作用(图B)。 为了确定AIB1是否可以直接与NICD结合,将大肠杆菌产生的GST-NICD蛋白与基于大肠杆菌提取物的无细胞蛋白质合成系统产生的AIB1蛋白孵育,进行GST pull down检测是否直接互作。 结果表明,GST-NICD蛋白,而不是GS...
3.结果解读：CO-IP可以保留蛋白质的天然结构和相互作用，有助于鉴定蛋白质的结构；而Pull Down可能会引入亲和标记对蛋白质的结构和功能产生影响，需要谨慎解读结果。CO-IP和Pull Down是两种常用的方法，用于解析蛋白质的结构。CO-IP可以保留蛋白质的天然结构和相互作用，适用于鉴定蛋白质的结构；而Pull Down操作相对...
此外,通过使用抗AIB1和抗NICD抗体的Co-IP分析,也可以在CT26细胞中检测到内源性AIB1和NICD的相互作用(图B)。 为了确定AIB1是否可以直接与NICD结合,将大肠杆菌产生的GST-NICD蛋白与基于大肠杆菌提取物的无细胞蛋白质合成系统产生的AIB1蛋白孵育,进行GST pull down检测是否直接互作。 结果表明,GST-NICD蛋白,而不是GS...
1.抗体选择:CO-IP需要特异性的抗体,而Pull Down需要选择合适的亲和标记。抗体的选择和亲和标记的引入都可能对蛋白质的结构和功能产生影响,需要谨慎考虑。 2.操作复杂度:CO-IP操作相对复杂,需要多个步骤和较长的时间;而Pull Down操作相对简单,时间较短,适用于高通量实验。 3.结果解读:CO-IP可以保留蛋白质的天然结...
并且研究中进⾏了⼤量的CoIP实验和GST pull-down实验。其中 Fig.2c的CoIP实验结果如下：要想看懂上⾯这个CoIP实验结果图，我们⾸先需要了解以下⼏个关键术语：IP：immunoprecipitation，代表免疫沉淀，富集⽬的蛋⽩；IB：immunoblotting，免疫印迹，即Western Blotting ，显⽰⽬的蛋⽩；
GST Pull-down 实验流程: 1蛋白样品的制备 2体系孵育 3 GST Pull-down 4 洗涤 5 洗脱 6 WB检测或其他方式检测 三 实验结果解析 Co-IP 文献案例 图3 验证蛋白 NLRP3 与蛋白 GSN 之间是否存在互作的结果图。实验中 NLRP3 蛋白带有 FLAG 标签,GSN 蛋白带有 Myc 标签。
coip实验和 gst pull-down实验 。其中fig.2c的coip实验结果如下: 要想看懂上面这个coip实验结果图,我们首先需要了解以下几个关键术语: ip: immunoprecipitation,代表免疫沉淀,富集目的蛋白; ib: immunoblotting,免疫印迹,即western blotting ,显示目的蛋...
3.结果解读:CO-IP可以保留蛋白质的天然结构和相互作用,有助于鉴定蛋白质的结构;而Pull Down可能会引入亲和标记对蛋白质的结构和功能产生影响,需要谨慎解读结果。 CO-IP和Pull Down是两种常用的方法,用于解析蛋白质的结构。CO-IP可以保留蛋白质的天然结构和相互作用,适用于鉴定蛋白质的结构;而Pull Down操作相对简单...
Pull-Down 质谱是一种用于研究蛋白质-蛋白质相互作用的技术。它利用蛋白质的亲和标签(如 His 标签)来捕获目标蛋白质及其相互作用的蛋白质。这些蛋白质然后可以通过质谱进行鉴定。Pull-Down 质谱比 Co-IP 更直接,因为它不依赖于抗体的可用性和特异性,但可能会捕获到比 Co-IP 更多的非特异性相互作用。
为此,该作者又进行了GST pull-down实验。Fig.2d实验结果如下: 可以看见GST pull-down实验结果图,与CoIP实验非常类似,主要也分为两部分: Input部分检测未经过GST pull-down处理的样本,也是一种阳性对照。Input部分有三张WB结果: GAPDH代表以GAPDH抗体(anti-GAPDH)检测样本中GAPDH蛋白水平(GAPDH和Tubulin一样,都是常...