(3)通过DNA连接酶可将KpnⅠ酶解后回收的7.3kb的片段连接,进而获得Pf△Kpn-pUC119重组质粒。分析表中信息可知:当注射的重组质粒PfDNV-pUCl19的量在2500 ng及以上时,虫体最终死亡率与野生型病毒感染的结果-致。Pf△Kpn-pUC119重组质粒注射幼虫后没有感染的根本原因是:KpnⅠ酶解后再连接,导致PfDNV基因缺失了部分...
(3)选择可以正常表达的重组质粒 PfDNV-pUCl19,利用 KpnⅠ酶酶解后回收 7.3kb 的片段, 通过 的作用获得 PfΔKpn-pUC119 重组质粒,将两种重组质粒通过腹部注射 法注入黑胸大蠊幼虫体内,所得的结果如下表所示。质粒转染黑胸大蠊实验结果接种物接种虫数感染虫数感染百分数(%)PfDNV-pUCl192500µg20201001250µg...
(2)将重组质粒导入原核细胞,需要使用钙离子处理获取感受态细胞,氨苄青霉素抗性基因作为标记基因,便于筛选和鉴别重组质粒,所以在含有氨苄青霉素的培养基上培养一段时间后,挑选出部分菌株。用Hindll酶解菌株中的重组质粒,经电泳分析后发现有些菌株显示有5kb和3.7kb片段,还有些菌株显示有1.8kb和6.9kb片段,出现这种情况的...
分析表中信息可知:当注射的重组质粒PfDNV-pUCl19的量在2500ng及以上时,虫体最终死亡率与野生型病毒感染的结果-致。Pf△Kpn-pUC119重组质粒注射幼虫后没有感染的根本原因是:Kpnl酶解后再连接,导致PfDNV基因缺失了部分片段。故答案为:(1)PCR提高2)感受态转化(冰冻的氣化钙溶液处理)氨苄青霉素基因和质粒的正向和反向...
(8分)黑胸大蠊是一种生活在我国南方地区的主要卫生害虫,通过生物防治手段可以起到一定抑制虫害的作用。某研究小组对黑胸大蠊浓核病毒的PfDNV基因与pUCl19质粒进行重组
[题目]黑胸大蠊是一种生活在我国南方地区的主要卫生害虫.通过生物防治手段可以起到一定抑制虫害的作用.某研究小组对黑胸大蠊浓核病毒的PfDNV基因与pUCl19质粒进行重组构建.通过感染黑胸大蠊研究其病理特征.已知KpnⅠ.PstⅠ.HindⅢ3种限制酶的酶切位点不同.Amp为氨苄青霉素抗
[题目]黑胸大蠊是一种生活在我国南方地区的主要卫生害虫.通过生物防治手段可以起到一定抑制虫害的作用.某研究小组对黑胸大蠊浓核病毒的PfDNV基因与pUCl19质粒进行重组构建.通过感染黑胸大蠊研究其病理特征.已知KpnⅠ.PstⅠ.HindⅢ3种限制酶的酶切位点不同.Amp为氨苄青霉素抗