蛋白质翻译后修饰（Protein post-translational modifications, PTM）是指蛋白质主干链或氨基酸侧链上共价键的断裂或生成，也称为共价修饰。这种修饰扩展了20种天然氨基酸的化学组成和信息，在各个方面对蛋白质产生重大影响，包括活性、稳定性、功能、结构、定位、运输、信号转导及其与伴侣生物分子之间相互作用的模式等。因...
非组蛋白作为哺乳动物细胞中主要的乙酰化修饰底物,其乙酰化研究迅速在研究浪潮中占据一席之地。这种PTM参与了与生理和疾病相关的关键细胞过程,例如基因转录、DNA 损伤修复、细胞分裂、信号转导、蛋白质折叠、自噬和代谢等。乙酰化通过多种机制影响蛋白质功能,包括调节蛋白质稳定性、酶活性、亚细胞定位、与其他PTM的串扰...
③ 进行酶活突变体功能验证:将ATP/GTP结合位点突变掉(一般突变为不影响肽链构象也无法被修饰的丙氨酸),将突变型、野生型进行表达后,观察相关功能表征变化。 2、 确定激酶下游底物 ① 通过敲低激酶的方式检测敲低后细胞样品中磷酸化降低的蛋白; ② 再通过激酶酶活突变体表达后的样品进行IP-MS(免疫沉淀-质谱联用技...
综上所述,PTM翻译后修饰是蛋白质功能调控的重要手段之一,具有广泛的生物学意义和潜在的应用价值。随着研究的不断深入和技术的不断进步,相信未来我们将能够更深入地了解PTMs的奥秘,并将其应用于更多领域。
蛋白质甲基化是指通过将甲基从S-腺苷甲硫氨酸（SAM）转移至特定甲基受体而形成的蛋白修饰，通常发生于赖氨酸、精氨酸、组氨酸、天冬酰胺及谷氨酰胺的侧链，其中以赖氨酸和精氨酸的甲基化最为常见。与其他PTM类似，蛋白质甲基化也是一种可逆修饰。蛋白质甲基化修饰主要由生物酶介导，包括添加修饰的甲基转移酶和去除...
翻译后修饰(PTM)是指蛋白质在翻译后发生的化学修饰。抗体在生产、贮存及临床使用过程中,均可能产生各类翻译后修饰变异体。翻译后修饰可能导致抗体所带的电荷乃至结构发生变化,从而影响其与抗原及Fc受体的亲和力,进而影响抗体药物的活性等关键质量属性。因此,对抗体药物的各类翻译后修饰进行表征和工艺控制是有必要...
这种修饰能改变蛋白质的疏水性,影响蛋白的细胞定位和正常功能,往往伴随着线粒体、溶酶体的功能失调。这就像是给蛋白质穿上了“隐形斗篷”。这些PTM修饰方式真是五花八门,每一种都有其独特的功能和作用。如果你对这些感兴趣,不妨深入研究一下,说不定会有意想不到的发现哦!
分离的群体通过下游方法进行分析，如western blot或质谱，以确定POI是否在翻译后修饰。图1.免疫沉淀PTM修饰蛋白的一般工作流程。 利用优化的IP系统对检测目标POI的低丰度PTMs至关重要。蛋白抗体特异性IP: Western Blot分析 蛋白质特异性IP利用针对POI的抗体来免疫沉淀该蛋白质的所有物种。然后通过SDS-PAGE分离富集的蛋白...
分离出来的蛋白质群在下游应用（如 WB或MS）中进行分析，以确定靶蛋白质是否经过翻译后修饰。内源性 PTM 蛋白形态富集有两种方法：一种方法是使用能识别目标蛋白的亲和基质，另一种方法是使用相关 PTM 的特异性亲和基质。针对相关目标蛋白的亲和基质的IP可能会免疫沉淀出该特定蛋白的所有蛋白形式，而使用 PTM 特异性...