目的:采用基因工程手段表达PRRSV VR 2332菌株的核衣壳蛋白(N蛋白).方法:利用RT—PCR方法扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)VR 2332菌株的核衣壳蛋白(N蛋白)基因并将其克隆到原核表达载pEq30a(+)上,得到重组质粒rpE330a—PRRSV/N,并将其转入受体菌 E.coli BL21(DE3)pLysS感受态细胞中,经IPTG诱导,通过SDS—PAG...
prrsvn蛋白是一种碱性蛋白,局部亲水性较好,通过调整表达条件和添加促溶标签等方式即可实现其在大肠杆菌的可溶性表达,表达后经westernblot验证其免疫原性,即可得到大量高纯度的重组n蛋白。 综上,有必要提供一种体外制备rrsvn蛋白单克隆抗体的方法,对后续开发其他检测方法,对跟踪监测、预防控制欧洲型prrsv在我国流行趋势均...
N蛋白是由相对保守的PRRSVORF7编码的核衣壳蛋白(nucleocapsidprotein),在保护病毒RNA及病毒复制、转录和病毒粒子的装配过程中发挥重要作用。早期研究表明N蛋白是PRRSV感染过程中产生最多的结构蛋白,可以在感染早期诱发机体产生大量特异性抗体。同时也有研究发现使用杆状病毒表达的N蛋白作为亚单位疫苗免疫宿主后,可对PRRSV...
本发明涉及细胞免疫技术领域,具体涉及一种美洲型PRRSV N蛋白单克隆抗体、其制备方法及其应用。背景技术猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproduetive and Respiratory Syndrome,PRRS)是目前世界养猪业危害最为严重的病毒性疾病。感染 PRRSV 后母猪以生殖障碍为特征,主要表现为早产、晚期流产、死胎、木乃伊胎、发热、厌食等,感染...
猪繁殖与呼吸系统综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是PRRS病毒(PRRSV)引起的一种接触性传染病,该病一度对世界养猪业造成毁灭性的经济损失.NSP9是依赖RNA的RNA聚合酶(RNA dependent RNA polymerase,RdRp),在病毒转录和复制中有重要作用.N蛋白是PRRSV感染细胞中表达丰度最高的病毒蛋白,其最重...
阻断ELISA试验显示1H4 MAb与病毒的结合能够被PRRSV阳性血清阻断.Western blot试验显示1H4 MAb可以特异性识别PRRSV的N蛋白,经截短表达N蛋白鉴定该MAb的抗原识别序列为N蛋白末端aa 107～aa 123.该抗原表位在美洲型PRRSV中高度保守,该MAb的制备为进一步建立特异性强、灵敏度高的PRRSV阻断ELISA检测方法奠...
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PRRSV辽宁株N蛋白基因的克隆及序列分析