此结构的Protein A大量结合IgG的同时,其非Fc结合域能结合部分杂蛋白,导致洗脱下来的IgG纯度不够,因此科学家利用基因工程的方法克隆Protein A的基因并进行改造,得到重组型Protein A,其非特异性结合明显降低。重组的Protein A经过改造后有一个...
天然的Protein A有5个IgG结合结构域和未知功能的非Fc结合域,结构示意图如下: 图3 Protein A的结构域示意图 此结构的ProteinA大量结合IgG的同时,其非Fc结合域能结合部分杂蛋白,导致洗脱下来的IgG纯度不够,因此科学家利用基因工程的方法克隆Protein A的基因并进行改造,得到重组型Protein A,其非特异性结合明显降低。...
因此,与Protein A和Protein G相比,Protein L能与更广泛的含有kappa轻链的免疫球蛋白类结合,是亲和层析和抗体固定化的有利工具。 图5 抗体基本结构和Protein A、Protein G、ProteinL结合位点 4. Protein A/G 以基因工程方法重组的Protein A/G包含Protein A的5个免疫球蛋白结合区域和Protein G的2个结合区域,结合...
Protein A、Protein G是最常应用于抗体亲和纯化和免疫沉淀的蛋白。将Protein A、G分别固定在不同的介质上,或同时将Protein A、G共价偶联到介质表面,是从腹水、细胞培养物上清和血清中分离IgG和IgG亚家族的有效工具。 将蛋白样本Protein A和Protein G纯化IgG,IgG片段和亚类的基础是二者对IgG-类型的多克隆抗体和单...
Protein A、Protein G和Protein L在抗体纯化领域具有广泛应用,但它们的特性和适用范围有所不同。例如,Protein A主要与IgG的Fc区域结合,适用于从人源样本中纯化IgG1、IgG2和IgG4;而Protein G则具有更广泛的结合能力,包括与大鼠和山羊的免疫球蛋白结合。此外,Protein L通过轻链相互作用结合抗体,因此能够结合更宽范围...
Protein G并不是我们熟知的G Protein(细胞表面G蛋白), 而是G族链球菌的细胞表面蛋白,分子量25kDa,和IgG的Fc区域特异性结合,还能以低亲力与Fab区域特异性的结合,但不与IgA和IgM结合。相比于Protein A,Protein G可以更广泛、更强地、与更多类型的IgG结合,但是载量却较低,约20mg人IgG/ml。
Protein A与Protein G有何不同?目前,绝大多数的IgG纯化使用Protein A、Protein G亲和层析,它们是来自于不同微生物的蛋白质,对于IgG具有特异性的亲和作用,而对于其他杂蛋白没有或者只有很弱的结合,因此具有极…
亲和介质特性特点基团脱落少结合特异性强基质6的交联琼脂糖凝胶配基重组蛋白g配基密度6mg重组蛋白gml吸附载量37mglgg2aml亲和介质的颗粒大小50160最大流速200cmhph范围310在位清洗时ph范围可到211使用温度常温保存温度48c保存液体20乙醇三适用范围proteina和proteing的相对结合强度物种物种结合proteiniga可变igm可变鸡蛋黄...
ProteinAProteinG与抗体的结合1 Protein A Sepharose rProtein A Sepharose亲和层析介质与抗体的结合目前,约7080的抗体纯化使用 Protein AProtein G 亲和层析。蛋白 A
Protein A作为抗体亲和捕获配基,得到广泛关注和竞相开发,它是金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureu) 细胞壁的组分,和胞壁的肽聚糖共价结合,简称为SpA[1, 2]。分子量42 KD,为单条多肽链分子,天然序列中不含半胱氨酸,因此人为在末端加入Cys后,可用于定向偶联[3]。SpA...