方法/步骤 1 操作之前首先讲一下大概原则：1、一侧引物（上/下游）尽量位于载体质粒骨架上，另一侧位于插入目的基因序列上。2、PCR产物大小不宜超过1000bp或小于200bp。3、特殊情况时，亦可选用仅扩增部分插入片段的引物对（一般不建议，须同时辅助其他验证手段）。2 接下来，咱们开始演示如何使用primer 3 plus来设计...