Primers and Probe Design For Real-Time PCR 二、Primers/Probes Design Guideline TaqMan Probe Primer Probe 与Primer 的距离愈近愈好, PCR产物大小建议在50-150 bp为最佳 G/C % 为30-80 % 避免有重复序列的出现,尤其避免4个以上G的出现 Tm 值: 68-70℃ (Quantification assay) Tm 值: 58-60℃ 65...
软件计算出来的 Tm值应当在 58- 60 °C 之间。 6. 3 end 的 5 个碱基中 G and/or C 碱基的总数不能超过 2 个。 实时 TaqMan 引物和探针设计 Begin by opening Primer Express and selecting File, New, and TaqMan? Primer Probe Design. The following screen will appear. You can close the ...
Primer Express Operation Guide Primer Express v3.0 Primers and Probe Design For Real-Time PCR Primer Express Operation Guide Primers/Probes Design Guideline TaqMan Probe Primer Probe Primer 離 , PCR 50-150 bp G/C % 30-80 % 列 4 G Tm : 68-70 (Quantification assay) Tm : 58-60 65-67...
SYBR Green等荧光染料法是使用带有荧光的、非特异的DNA结合染料SYBR Green等以检测PCR过程中积累的PCR扩增产物;而探针法(Probe method),也常被称为TaqMan探针法,不使用荧光染料,而采用荧光基团和淬灭基团(Quencher)标记的DNA探针靶向拟通过PCR检测的目标序列[1,2]。
3. ”Parameters” Tab Primer/Probe Tm Primers/Probe Primer Express Operation Guide ”Sequence” Tab Tools → Find Primers/Probes Primers/Probe pairs Primer Express Candidate Primers & Probe pairs ”Location”? search primers & probes ? 50 ? ”Primers / Probes” Tab ? ”Sequence” Tab ...
SYBR Green等荧光染料法是使用带有荧光的、非特异的DNA结合染料SYBR Green等以检测PCR过程中积累的PCR扩增产物;而探针法(Probe method),也常被称为TaqMan探针法,不使用荧光染料,而采用荧光基团和淬灭基团(Quencher)标记的DNA探针靶向拟通过PCR检测的目标序列[1,2]。 对于SYBR Green等染料法,引物至关重要。本系列...
SYBR Green等荧光染料法是使用带有荧光的、非特异的DNA结合染料SYBR Green等以检测PCR过程中积累的PCR扩增产物;而探针法(Probe method),也常被称为TaqMan探针法,不使用荧光染料,而采用荧光基团和淬灭基团(Quencher)标记的DNA探针靶向拟通过PCR检测的目标序列[1,2]。
(and their default values) are: Tm (57-63°C), primer size (18-27 bp), GC content (45-55%), maximum 3' stability (9.0 kcal/mol), maximum self-complementarity (8.0) and maximum 3' self-complementarity (3.0). It should be noted that, instead of using the default settings in ...
SYBR Green等荧光染料法是使用带有荧光的、非特异的DNA结合染料SYBR Green等以检测PCR过程中积累的PCR扩增产物;而探针法(Probe method),也常被称为TaqMan探针法,不使用荧光染料,而采用荧光基团和淬灭基团(Quencher)标记的DNA探针靶向拟通过PCR检测的目标序列[1,2]。
The design of the probe also adopts a clasp design structure, which can make the fluorescent group and the quenching group close, and there would be no fluorescence when the probe forms a ring structure. At the same time, the probe sequence contains 2-5 CG sites for specific recognition of...