②成熟crRNA的形成。NUC区的Helical-1和HEPN2结构域之间保守残基的构象发生变化,从而形成一个酸碱催化中心,催化酶切pre-crRNA形成成熟的crRNA。此时的crRNA-Cas13a复合物处于无酶切活性状态; ③crRNA-Cas13复合物酶切活性的激活。靶ssRNA进入crRNA-Cas13a复合物内与crRNA发生碱基互补配对,诱发Cas13a发生构象变化,从而激...
首先,在适应阶段,与病毒或质粒序列同源的DNA短片段会被整合到CRISPR的间隔区;在表达阶段,CRISPR基因序列的一级转录本pre-crRNA产生,并被加工成crRNA,crRNA与病毒或质粒的靶序列匹配;在干扰阶段,crRNA将Cas蛋白引导至与间隔区匹配的病毒或质粒处形成效应复合物,并利用Cas蛋白切割靶序列。其中,PAM序列是crRNA引导Cas蛋白...
Cas12c RuvC 结构域负责 pre-crRNA 的处理 随后,研究人员推测 Cas12c 的 RuvC 核酸酶结构域是执行 pre-crRNA 加工的部位。与该假说一致的是,当将 RuvC 金属配位羧酸盐突变后,Cas12c 的 pre-crRNA 处理活性随即丧失。 为了验证 RuvC 结构域在 pre-crRNA 加工中的作用,他们评估了 Cas12c 加工 pre-crRNA 后产...
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4月21日,哈尔滨工业大学生命学院黄志伟教授团队在《自然》(《Nature》)在线发表了题目为《CRISPR-Cpf1结合crRNA的复合物晶体结构》(《The crystal structure of Cpf1 incomplex with CRISPR RNA》)的研究论文。该项研究通过结构生物学和生化研究手段揭示了CRISPR-Cpf1识别CRISPR RNA (crRNA)以及Cpf1剪切pre-crRNA成...
We have examined the processing of precursor-clustered regularly interspaced short palindromic repeat (CRISPR) RNAs (pre-crRNAs) of the Type I CRISPR-system by incubation of radiolabeled model RNAs with recombinant CRISPR-associated () , followed by denaturing gel electrophoresis (PAGE) of the ...
该研究详细阐述了DiCas7-11加工pre-crRNA和切割tgRNA的机制、DiCsx29对DiCas7-11切割tgRNA活性调控的机制以及DiCsx29蛋白酶活性激活的调控机制。该工作丰富了科学家对CRISPR-Cas系统的认知,有助于将DiCas7-11改造为新型的、无细胞毒性的RNA操控工具[强]『前沿科技 | 中科院科学家在III-E型CRISPR-Cas系统研究方面取...
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Cas5d processes pre-crRNA and is a member of a larger family of CRISPR RNA endonucleases 喜欢 0 阅读量: 21 作者: Garside,L E.,Schellenberg,J M.,Gesner,M E.,Bonanno,B J.,Sauder,M J. 展开 摘要: Small RNAs derived from clustered, regularly inter 展开 被引量: 102 年份: 2012...