1. pPIC9K线性化载体使用方法: (1) pPIC9K线性化载体当做克隆载体使用,可以在扩增PCR产物的 上游引物 5’端添加序列:GAGAGGCTGAAGCTTACGTAGAATTC 下游引物 5’端添加序列:GCGAATTAATTCGCGGCCGC 通过无缝克隆连接到pPIC9K中。 (2) 测序引物 AOX1-F:GACTGGTTCCAATTGACAAGC或alpha-Factor-F:TACTATTGCCAGCATTG...
答案：在进行ppic9k转化酵母的过程中，线性化是必要的步骤，因为这有助于提高转化效率。不同酶切位点产生的线性化效果有所不同，这会因酶的特性、识别序列的特异性及其切割效率而异。详细解释：1. 为何需要线性化：在转化酵母时，质粒DNA通常为环状。而酵母转化过程通常需要高效的DNA导入方法，如电穿孔...
插入pPIC9K并导入DH5α获得阳性克隆,经PCR 反应和双酶切鉴定表明重组质粒是βhCG-pPIC9K,并转化嗜甲醇...
bglII是用来在体外做串联表达盒用的，本职作用并不是线性化的位点。毕赤酵母表达手册上面指出，ppic9k...
Sal I，Bgl II酶切位点，我可以选择BspE I做线性化么，我的载体是9k 发自小木虫Android客户端 ...
(3) pPIC9K线性化载体为 EcoRⅠ酶切后的线性化载体,图谱及多克隆位点见下图。 公司正在出售的产品: Rhesus antibody Rh SCRO/DCUN1D1相关蛋白抗体 规格0.2ml Porcinegrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISAKit猪促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒96T/48T进口分装 ...
线性化方便目的基因的插入重组,我们一般在Sal1位点线性化,否则不能通过同源重组整合到酵母的基因组上。一般来说,选SacⅠ线性化整合,重组率要高一些 不同的酶切位点的产生的线性化的酵母的表性如下 重组质粒βhCG-pPIC9K的构建及嗜甲醇酵母(Pichia pastoris)的转化 目的:为用基因重组技术表达hCG避孕疫苗抗原,构建在...
线性化方便目的基因的插入重组,我们一般在Sal1位点线性化,否则不能通过同源重组整合到酵母的基因组上。一般来说,选SacⅠ线性化整合,重组率要高一些 不同的酶切位点的产生的线性化的酵母的表性如下 重组质粒βhCG-pPIC9K的构建及嗜甲醇酵母(Pichia pastoris)的转化 目的:为用基因重组技术表达hCG避孕疫苗抗原,构建在...
目的:为用基因重组技术表达hCG避孕疫苗抗原,构建在酵母细胞中表达的重组质粒βhCG-pPIC9K, 转化嗜甲醇...
不同的酶切位点的产生的线性化的酵母的表性如下 重组质粒βhCG-pPIC9K的构建及嗜甲醇酵母(Pichia pastoris)的转化 目的:为用基因重组技术表达hCG避孕疫苗抗原,构建在酵母细胞中表达的重组质粒βhCG-pPIC9K, 转化嗜甲醇酵母. 方法:根据βhCG的cDNA 序列设计两条引物,使上游带EcoR I酶切位点,下游带Not...