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TAKARA的PMD18-T载体可起世以用哪个通用引物验证?网友 1 最佳答案 回答者:网友 用这两种引物:BcaBEST Sequencing Primer M13-47和煤存本视BcaBEST Sequencing Primer RV-MVector size (bp) 2692Cloning Site 425LacZ α-peptide 146-475Ampicillin resistance gene 1632~2492pUC origin 873-流会远属局立织那小...
可以用自己基因片段的引物,也可以用一个通用引物,一个自己目的片段引物。最好是酶切鉴定
除了载体,引物结合位点对通用引物的选择也有很大影响。由于Sanger测序法的局限性,通常刚开始的50bp-100bp测序不太稳定,通用引物不能距离克隆位点太近(建议大于50bp),否则有可能会导致部分目的片段测不出来。因此,T载体(pMD 18-T载体)的测序通常选择正向引物M13F(-47)和反向引物M13R(-48)而不建议选择M13F和M13R。