首先，准备工作至关重要。确保实验所用的 THP-1 细胞处于良好的生长状态，细胞活性高且无污染。准备适量的 PMA 储备液，一般将 PMA 溶解在 DMSO（二甲基亚砜）中配制成高浓度储备液，以便后续使用。接着进行诱导过程。将 THP-1 细胞接种在合适的培养容器中，如培养瓶或培养板。根据细胞密度和实验需求，加入适量的...
用PMA孵育THP-1细胞48h，显示THP-1(40X)在(A)诱导前(B)诱导后的形态学变化。它们的形态由圆形变...
通过PMA诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞(Mφ),是在体外研究人Mφ的常用模型。然而,这一模型仍缺乏统一的诱导方法。近期,来自中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所梁米芳和王世文领衔的研究团队,在综合性期刊《PLoS One》发表了一项研究,他们从培养时间、细胞密度、PMA浓度这三方面优化了THP-1细胞分化为Mφ的诱导条件,...
thp-1诱导实验原理thp-1诱导实验原理 THP-1细胞诱导实验原理如下: THP-1细胞是单核细胞系,通常用于模拟研究人体单核细胞/巨噬细胞的生物学特性和功能。这些细胞可以被诱导分化为不同类型的巨噬细胞,如M1型和M2型巨噬细胞。 在具体的诱导分化实验中,THP-1细胞首先被佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞。这个过程中,...
THP - 1 细胞作为人单核细胞白血病细胞系,在科研领域常被用于诱导分化为巨噬细胞,以模拟体内巨噬细胞功能与特性,而佛波酯(PMA)是诱导这一过程的关键试剂。以下详述操作要点。 前期准备至关重要。先确保细胞培养环境稳定适宜,在含 10% 胎牛血清、1% 青 - 链霉素的 RPMI 1640 培养基里,将 THP - 1 细胞置于 ...
我们将通过流式细胞术检测分化过程中细胞表面标志物的表达变化,如CDCD68等,以及细胞内分子如肿瘤坏死因子TNF-α、白介素IL-1β等的表达情况,从而全面揭示PMA诱导THP-1细胞向巨噬细胞分化的分子机制。 通过本文的研究,我们期望能够为深入理解巨噬细胞分化过程中的分子事件提供新的视角,并为开发针对巨噬细胞相关疾病...
THP-1 1.THP-1细胞的诱导分化 (1)THP-1用185ng/ml佛波酯(PMA,用DMSO溶解)作用6小时,诱导细胞分化为巨噬细胞(M0)。 (2)在PMA继续存在的情况下,通过分别: •与IFN-γ(20 ng/ml)和LPS(100 ng/ml)孵育48小时以上,使其向M1表型极化。 •与IL-4(20 ng/ml)和IL-13(20 ng/ml)孵育48小时以上,...
方法首先用PMA刺激THP-1细胞分化为巨噬细胞,再分别使用LPS、IFN-γ和IL-6将细胞诱导为M1型巨噬细胞,用IL-4、IL-13和IL-6将细胞诱导为M2型巨噬细胞。显微镜下观察三种细胞的形态学改变,并用流式细胞术检测各细胞主要CD分子表达的差异。结果当THP-1分化为巨噬细胞后变为贴壁生长,细胞形态呈较规则的圆形或椭圆...
目的:用流式细胞术明确单独使用PMA诱导THP-1细胞分化而来的巨噬细胞的分化情况。 方法:首先用PMA刺激THP-1细胞分化为巨噬细胞,再分别使用LPS、IFN-γ和IL-6将细胞诱导为M1型巨噬细胞,用IL-4、IL-13和IL-6将细胞诱导为M2型巨噬细胞。显微镜下观察三种细胞的形态学改变,并用流式细胞术检测各细胞主要CD分子表达...
首先,我们需要在6孔板里铺细胞。具体来说,每孔加入200万细胞(贴壁后细胞密度大概80%-90%),然后加入80ng/mL的PMA(这个PMA是MCE的HY-18739,用DMSO溶解)。最后,每孔再加2mL完全培养基,然后诱导24小时。 镜下观察 🔬 24小时后,你可以在显微镜下看看细胞状态。你会发现细胞几乎全都贴壁了,有些还成了梭形,胞...