取对数生长期 THP - 1 细胞,计数后按 1×10⁶个 /mL 密度接种至培养器皿,像 6 孔板、24 孔板等依实验规模选定。加入 PMA 使其终浓度达 20 - 100 ng/mL(常选 50 ng/mL),轻柔摇匀确保均匀分布。随即放回培养箱,24 - 48 小时是关键观察期。期间,细胞形态渐变,由悬浮的圆形单核细胞向贴壁伸展、胞体...
thp-1诱导实验原理thp-1诱导实验原理 THP-1细胞诱导实验原理如下: THP-1细胞是单核细胞系,通常用于模拟研究人体单核细胞/巨噬细胞的生物学特性和功能。这些细胞可以被诱导分化为不同类型的巨噬细胞,如M1型和M2型巨噬细胞。 在具体的诱导分化实验中,THP-1细胞首先被佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞。这个过程中,...
首先，准备工作至关重要。确保实验所用的 THP-1 细胞处于良好的生长状态，细胞活性高且无污染。准备适量的 PMA 储备液，一般将 PMA 溶解在 DMSO（二甲基亚砜）中配制成高浓度储备液，以便后续使用。接着进行诱导过程。将 THP-1 细胞接种在合适的培养容器中，如培养瓶或培养板。根据细胞密度和实验需求，加入适量的...
目的:用流式细胞术明确单独使用PMA诱导THP-1细胞分化而来的巨噬细胞的分化情况。 方法:首先用PMA刺激THP-1细胞分化为巨噬细胞,再分别使用LPS、IFN-γ和IL-6将细胞诱导为M1型巨噬细胞,用IL-4、IL-13和IL-6将细胞诱导为M2型巨噬细胞。显微镜下观察三种细胞的形态学改变,并用流式细胞术检测各细胞主要CD分子表达...
THP-1 1.THP-1细胞的诱导分化 (1)THP-1用185ng/ml佛波酯(PMA,用DMSO溶解)作用6小时,诱导细胞分化为巨噬细胞(M0)。 (2)在PMA继续存在的情况下,通过分别: •与IFN-γ(20 ng/ml)和LPS(100 ng/ml)孵育48小时以上,使其向M1表型极化。 •与IL-4(20 ng/ml)和IL-13(20 ng/ml)孵育48小时以上,...
一、THP-1细胞来源巨噬细胞极化及鉴定 1.1 用RPMI 1640完全培养基(1640培养基+10%FBS+双抗)重悬...
PMA诱导THP-1源巨噬细胞的MMP-1表达
用PMA孵育THP-1细胞48h，显示THP-1(40X)在(A)诱导前(B)诱导后的形态学变化。它们的形态由圆形变...
THP-1细胞是从急性单核细胞白血病患者外周血中分离出来的单核细胞,广泛应用于单核细胞和巨噬细胞相关机制、信号通路等研究;形态和分化特性类似于原代单核细胞和巨噬细胞,在体外,常用PMA(phorbol 12-肉豆酸酯13-乙酸酯)或1α,25(OH)2D3 (1α,25-二羟基维生素D3或vD3)诱导分化THP-1细胞为巨噬细胞。因此,THP...
基于此,本研究拟对不同浓度PMA作用THP-1细胞后,其CD11b、CD14的表达进行分析,初步考察了PMA诱导THP-1细胞分化的条件,为后续相关实验提供实验依据。 1 材料与方法 1.1 细胞株及主要试剂 人来源的单核细胞白血病细胞株THP-1(中科院上海细胞库);佛波醇PMA(美国Sigma公司);RPMI-1640培养基、胎牛血清(美国Gibco公司)...