THP-1细胞可通过化学物质处理、细胞因子刺激或共培养等方法,诱导其分化为具有巨噬细胞特性的细胞群。
首先,准备工作至关重要。确保实验所用的 THP-1 细胞处于良好的生长状态,细胞活性高且无污染。准备适量的 PMA 储备液,一般将 PMA 溶解在 DMSO(二甲基亚砜)中配制成高浓度储备液,以便后续使用。接着进行诱导过程。将 THP-1 细胞接种在合适的培养容器中,如培养瓶或培养板。根据细胞密度和实验需求,加入适量的...
先确保细胞培养环境稳定适宜,在含 10% 胎牛血清、1% 青 - 链霉素的 RPMI 1640 培养基里,将 THP - 1 细胞置于 37°C、5% CO₂的细胞培养箱中常规培养,维持细胞处于对数生长期,此时细胞活性与增殖能力强,为后续诱导分化奠基。同时,准备高质量的 PMA 试剂,以 DMSO 溶解配制成储存液,- 20°C 避光保存,使用...
thp-1诱导实验原理 THP-1细胞诱导实验原理如下: THP-1细胞是单核细胞系,通常用于模拟研究人体单核细胞/巨噬细胞的生物学特性和功能。这些细胞可以被诱导分化为不同类型的巨噬细胞,如M1型和M2型巨噬细胞。 在具体的诱导分化实验中,THP-1细胞首先被佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞。这个过程中,细胞会发生形态变化...
THP-1细胞是从急性单核细胞白血病患者外周血中分离出来的单核细胞,广泛应用于单核细胞和巨噬细胞相关机制、信号通路等研究;形态和分化特性类似于原代单核细胞和巨噬细胞,在体外,常用PMA(phorbol 12-肉豆酸酯13-乙酸酯)或1α,25(OH)2D3 (1α,25-二羟基维生素D3或vD3)诱导分化THP-1细胞为巨噬细胞。因此,THP...
PMA诱导THP-1步骤:将处于对数生长期的THP-1细胞离心,用RPMI-1640培养基重悬;加入PMA,显微镜下细胞...
通过PMA诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞(Mφ),是在体外研究人Mφ的常用模型。然而,这一模型仍缺乏统一的诱导方法。近期,来自中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所梁米芳和王世文领衔的研究团队,在综合性期刊《PLoS One》发表了一项研究,他们从培养时间、细胞密度、PMA浓度这三方面优化了THP-1细胞分化为Mφ的诱导条件,...
THP-1 1.THP-1细胞的诱导分化 (1)THP-1用185ng/ml佛波酯(PMA,用DMSO溶解)作用6小时,诱导细胞分化为巨噬细胞(M0)。 (2)在PMA继续存在的情况下,通过分别: •与IFN-γ(20 ng/ml)和LPS(100 ng/ml)孵育48小时以上,使其向M1表型极化。 •与IL-4(20 ng/ml)和IL-13(20 ng/ml)孵育48小时以上,...
THP-1细胞的极化及鉴定过程如下:将细胞用RPMI 1640完全培养基重悬,加入终浓度为100ng/ml的PMA进行24h诱导分化。随后,将细胞分为两组进行极化:一组加入10ng/ml的LPS和20ng/ml的人类IFN-γ,另一组加入20ng/ml的人类IL-4和20ng/ml的人类IL-13。通过qRT-PCR、ELISA、流式细胞术等方法对细胞...
? ? 流式细胞术分析PMA诱导THP-1分化为巨噬细胞的表型特征 ? ? 彭卓颖,李想,丛喆,薛婧 (北京协和医学院比较医学中心,中国医学科学院医学实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室,新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室,北京 100021) 研究报告流式细胞...