细胞计数:对THP-1细胞进行计数,离心重悬后控制细胞密度为4×10^5/ml。 加入PMA工作液:按照细胞体积加入相应的PMA工作液,吹打混匀。 细胞培养:吸取100μl细胞悬液到96孔板中,24h、48h后观察。🔍 观察指标 高倍镜下,细胞胞浆内含有大量颗粒状物质,与之前透亮状态不同。 超过85%的细胞呈不规则形或椭圆型,贴...
首先,我们需要在6孔板里铺细胞。具体来说,每孔加入200万细胞(贴壁后细胞密度大概80%-90%),然后加入80ng/mL的PMA(这个PMA是MCE的HY-18739,用DMSO溶解)。最后,每孔再加2mL完全培养基,然后诱导24小时。 镜下观察 🔬 24小时后,你可以在显微镜下看看细胞状态。你会发现细胞几乎全都贴壁了,有些还成了梭形,胞...
在诱导过程中，需要密切观察细胞的变化。在加入 PMA 后不久，你会发现 THP-1 细胞开始发生形态变化。原本悬浮生长的 THP-1 细胞逐渐贴壁，细胞形态由圆形变为不规则形状，这是向巨噬细胞分化的重要标志。诱导时间一般为 24 - 48 小时，具体时间可根据实验需求和细胞状态进行调整。诱导完成后，对分化后的巨噬细胞...
（5）诱导成功的标志：单核细胞THP-1用PMA诱导后，由悬浮式生长变成贴壁生长，由圆形变成不规则形态，...
在具体的诱导分化实验中,THP-1细胞首先被佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞。这个过程中,细胞会发生形态变化和生长方式的改变,由悬浮式生长变成贴壁生长,由圆形变成不规则形态,体积进一步增大,细胞浆疏松,细胞核增大明显,可见大量明显细胞器,胞膜周围可见少量突起。 分化后的巨噬细胞可以被进一步诱导分化为M1型或M2型巨...
RAW264.7细胞是小鼠单核巨噬细胞白血病细胞，为贴壁细胞，是从用Abelson鼠科白血病病毒诱导的雄性小鼠的...
方法:首先用PMA刺激THP-1细胞分化为巨噬细胞,再分别使用LPS、IFN-γ和IL-6将细胞诱导为M1型巨噬细胞,用IL-4、IL-13和IL-6将细胞诱导为M2型巨噬细胞。显微镜下观察三种细胞的形态学改变,并用流式细胞术检测各细胞主要CD分子表达的差异。 结果:当THP-1分化为巨噬细胞后变为贴壁生长,细胞形态呈较规则的圆形或...
方法首先用PMA刺激THP-1细胞分化为巨噬细胞,再分别使用LPS、IFN-γ和IL-6将细胞诱导为M1型巨噬细胞,用IL-4、IL-13和IL-6将细胞诱导为M2型巨噬细胞。显微镜下观察三种细胞的形态学改变,并用流式细胞术检测各细胞主要CD分子表达的差异。结果 当THP-1分化为巨噬细胞后变为贴壁生长,细胞形态呈较规则的圆形或...
THP-1细胞来源于人急性单核细胞性白血病细胞系,属于血液系统肿瘤细胞范畴。PMA能够诱导THP-1贴壁,在光镜下可见其紧密贴壁,呈现梭形或者多形性,并有伪足形成,分化为成熟巨噬细胞[7]。鉴于其种属来源为人,在某些方面可替代人血液及组织中的人单核/巨噬细胞。虽然这是一个非常经典又常见的细胞模型,但以往文献无论...
取对数生长期 THP - 1 细胞,计数后按 1×10⁶个 /mL 密度接种至培养器皿,像 6 孔板、24 孔板等依实验规模选定。加入 PMA 使其终浓度达 20 - 100 ng/mL(常选 50 ng/mL),轻柔摇匀确保均匀分布。随即放回培养箱,24 - 48 小时是关键观察期。期间,细胞形态渐变,由悬浮的圆形单核细胞向贴壁伸展、胞体...