克隆进MISSION® TRC shRNA的pLKO.1转运载体与标准2型质粒(含有rev基因的包装载体和包膜载体)或3型质粒(不含rev基因的载体,包膜载体和rev表达载体)包装系统相容。哪些限制性位点可用来克隆shRNA序列?我之所以对此感兴趣,是因为我希望获得部分shRNA结构,但我是否需要将序列插入到不同的骨架载体?shRNA 克隆进...
克隆进MISSION®TRC shRNA的pLKO.1转运载体与标准2型质粒(含有rev基因的包装载体和包膜载体)或3型质粒(不含rev基因的载体,包膜载体和rev表达载体)包装系统相容。 哪些限制性位点可用来克隆shRNA序列?我之所以对此感兴趣,是因为我希望获得部分shRNA结构,但我是否需要将序列插入到不同的骨架载体?
MISSION® shRNA载体图谱 pLKO.1载体是否是基于HIV的载体?如果是的话,是否存在安全问题? pLKO.1载体载体是基于慢病毒(HIV)的质粒。这种载体被认为是生物安全性2级材料,由于其改良特性(去除了大量蕴含着HIV病毒毒力的附属基因、最大限度减少病毒微粒的基因组含量,无复制能力及自灭活特性)而无法在感染宿主细胞之后产...
bili_11153021741创建的收藏夹甲基化修饰内容:PLKO.1 shRNA设计与载体构建,如果您对当前收藏夹内容感兴趣点击“收藏”可转入个人收藏夹方便浏览
点击设计 5.后续的根据自己的载体手工设计shRNA (以PLKO.1-puro设计,酶切位点AgeI EcoRI,酶切位点后1300bp有一个单一的酶切位点KpnI) 注意:shRNA比较短,而且结构复杂,测序困难,选择载体上的单一酶切位点,设计到shRNA后面,用于后续的单酶切验证。
点击设计shRNA OLigos 网页上的loop 可以不更改(后面需要更改为常用loop序列TTCAAGAGA) 点击设计 设计好的序列如下(上面是以thermo的载体(pENTR™/U6)设计) (-puro设计,酶切位点AgeI EcoRI,酶切位点后1300bp有一个单一的酶切位点KpnI) 注意:shRNA比较短,而且结构复杂,测序困难,选择载体上的单一酶切位点,...
shRNA设计 此教程用于不知道siRNA靶点的设计,从文献中选择序列,可以从第5步开始设计 1.选择基因 例如GeneName:TP53Accession:NM_000546.5 2.寻找靶点 http://rnaidesigner.thermofisher/rnaiexpress/setOption.do?designOption=shrn a&pid=-7168952604080645646 ...
/U6)设计)5.后续的根据自己的载体手工设计shRNA(以PLKO.1-puro设计,酶切位点AgeI EcoRI,酶切位点后1300bp有一个单一的酶切位点KpnI)注意:shRNA比较短,而且结构复杂,测序困难,选择载体上的单一酶切位点,设计到shRNA里面,用于后续的单酶切验证设计模板按照下图(下图去除AgeI和EcoRI,也可以适当位置添两个...
靶( 选教 程用于不 知选 择基因 如 Gene Name寻 找靶点 p://rnaidesid=-7168952入基因序列号击 RNAi 设计 靶 点选择 选 择星号比 较知A 道 siRNA 靶e: TP53 signer.ther26040806456号,或者粘贴较3 多的 2-3 个靶 点的设计,Accession:rmofisher.co646 贴序列 个 作为目的序shRNA 设计从文献中选NM...
克隆进MISSION® TRC shRNA的pLKO.1转运载体与标准2型质粒(含有rev基因的包装载体和包膜载体)或3型质粒(不含rev基因的载体,包膜载体和rev表达载体)包装系统相容。哪些限制性位点可用来克隆shRNA序列?我之所以对此感兴趣,是因为我希望获得部分shRNA结构,但我是否需要将序列插入到不同的骨架载体...