(底部四个图)将Super PiggyBac转座子酶表达载体(Cat.#PB210PA-1)和单个启动子PiggyBac克隆和单启动子表达载体(Cat.#PB531A-2)共转染到HEK293细胞中进一步证明了SBI的PiggyBac转座子系统提供的高效整合。生长七天后,转染Super PiggyBac转座子酶表达载体(+PB,右两个图)的大多数细胞RFP阳性。 图4 SBI的Excisio...
PiggyBac转座子(粉纹夜蛾)是一个2475bp长的可自主转移元件,两末端分别有一个由13bp和19bp的TIR序列组成的亚末端重复序列,两端TIR序列之间的间隔分别是3bp(5’端)和31bp(3’端),在两个亚末端重复序列之间,有一个1.8kb的开放阅读框,编码由594个氨基酸组成、分子量大小为64...
PiggyBac转座子结构与机制 PiggyBac转座子(粉纹夜蛾)是一个2475bp长的可自主转移元件,两末端分别有一个由13bp和19bp的TIR序列组成的亚末端重复序列,两端TIR序列之间的间隔分别是3bp(5’端)和31bp(3’端),在两个亚末端重复序列之间,有一个1.8kb的开放阅读框,编码由594个氨基酸组成、分子量大小为64KD的Piggy...
在不降低转座效率的情况下,两端优化后的TIR序列间可插入10kb左右的序列,研究表明,在小鼠中通过受精卵注射的方式,用PiggyBac转座子载体在基因组插入细菌人工染色体(BACs,150kb-300kb),转座效率最高的达到了45%(F0代中有45%的小鼠携带了BACs)。 应用
piggyBac 转座子在昆虫遗传转化中应用最广泛,稳定性相对较高,应用该转座子已 成功转化了多种昆虫。 其全长2472 bp,并且具有一对13 bp 末端反向重复序列和一对19 bp 副末端重复序列,在副末端重复序列之间是2.1 kb 转录单元,包含一个高频率切除和转座必需的1. 8 kb 编码转座酶的开放阅读框。piggyBac 转座子...
在不降低转座效率的情况下,两端优化后的TIR序列间可插入10kb左右的序列,研究表明,在小鼠中通过受精卵注射的方式,用PiggyBac转座子载体在基因组插入细菌人工染色体(BACs,150kb-300kb),转座效率最高的达到了45%(F0代中有45%的小鼠携带了BACs)。 应用
蚕业科学CANYEKEXUE第26卷增刊2000年11月昆虫转基因载体———piggyBac转座子钟伯雄3颜海燕汪方炜(浙江大学动物科学学院蚕蜂科学系,杭州310029)摘要piggyBac转座子在分类上属于真核生物的第二类转座子,是一个自主因子,长2476bp,有短的末端反向重复序列(ITR)和一个可读编码框(ORF),ITR长13bp,ORF长211kb。piggyBac...
昆虫转基因载体——piggyBac转座子
PiggyBac转座子载体系统组成 PiggyBac转座子在发现后经过了一系列优化和改造的过程,如转座酶密码子优化,以及两端TIR序列的简化,最后形成了一套完整的PiggyBac载体系统。PiggyBac载体系统成员主要有:一个辅助质粒:编码转座酶;一个转座子质粒:含优化的两端亚末端反向重复序列,中间是被转座区域,可插入我们想转座到宿主基...