传统蛋白磷酸化的研究需要特异的磷酸化抗体、RI 等其它试剂,操作复杂,花费大,且放射性元素会有安全隐患,而Phos-tag ™ 的出现恰恰可以弥补这些缺点,为磷酸化蛋白研究提供新的方向。 磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白利用Phos-tag ™ SDS-PAGE 的分离效果图 Lane 1 为非磷酸化蛋白,Lane 2-5 为磷酸化蛋白,各蛋白因...
Phos-tag™浅绿染料选择性:用Phos-tag™浅绿对10%(w/v)的PAGE胶进行染色,其中分别含有四组完整的以及经ALP(碱性磷酸酶)处理的磷酸蛋白(α-酪蛋白,β-酪蛋白,卵清蛋白和胃蛋白酶各1微克)(左),然后使用考马斯亮蓝CBB G-250染色(右)。 成功特异性地检测出SDS-PAGE后的磷酸化蛋白。 数据提供:广岛大学研究...
进行正常的SDS-PAGE实验和Mn2+-Phos-tagTMSDS-PAGE实验,转膜后用MAPK的非磷酸化抗体作为一抗进行检测(检测所有的MAPK,包括磷酸化和非磷酸化)。正常SDS-PAGE实验中,磷酸化的MAPK和非磷酸化MAPK没有分离,而在Mn2+-Phos-tagTMSDS-PAGE实验中磷酸化MAPK和非磷酸胡MAPK发生分离,所以转膜后,用MAPK抗体检测,可以看到分...
Phos-tag SDS-PAGE是一种磷酸亲和电泳技术,可使用常规SDS-PAGE程序分离磷酸化和非磷酸化蛋白质。该技术使用分离凝胶,其中丙烯酰胺与作为磷酸捕获分子的Phos-tag Acrylamide共聚。试剂、蛋白质样品制备和电泳操作与常规SDS-PAGE程序相似。由于磷酸化蛋白质在电泳过程中与固定在凝胶中的Phos-tag表现出可逆结合,因此它们的...
Phos-tag™ Biotin是与生物素结合的Phos-tag™,可用于免疫印迹法检测磷酸化蛋白。Phos-tag™ Biotin BTL-104和BTL-105可灵敏检测PVDF膜上的磷酸化蛋白。 ◆原理 ◆优点、特色 ●无辐射。 ●无需PVDF膜的封闭处理。 ●Phos-tag™的特异性结合与氨基酸种类、序列无关。
◆分离磷酸化蛋白!在制备SDS-PAGE预制胶过程中加入Phos-tag™ Acrylamide,即可根据磷酸化水平和磷酸化位点分离磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白。原理 1. 电泳中的磷酸化蛋白捕获2个二价金属离子。2. 磷酸化水平越高电泳速度越慢。3. 根据磷酸化水平进行分离。(即使磷酸化位点的数目相同,但只要位置不同就能分离)特点...
英 文 名: Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution 产地: 日本 商家: Wako(和光纯药工业株式会社) wao Phos-tag™实验设计 ◆ 研究领域 磷酸化蛋白和磷酸化多肽的研究 ◆ Phos-tagTM的简介 Phos-tagTM(Phosphate-binding tag)是由日本广岛大学的Kinoshita等研制的磷酸化蛋白蛋白捕获分子。Phos-...
英 文 名: Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution 产地: 日本 商家: Wako(和光纯药工业株式会社) wao Phos-tag™实验设计 ◆ 研究领域 磷酸化蛋白和磷酸化多肽的研究 ◆ Phos-tagTM的简介 Phos-tagTM(Phosphate-binding tag)是由日本广岛大学的Kinoshita等研制的磷酸化蛋白蛋白捕获分子。Phos-...
磷酸化蛋白—Phos-tg™ 丙烯酰胺 Phos-tag™ SDS-PAGE操作简单,只需在常规SDS-PAGE胶中加入Phos-tag™ Acrylamide 和二价锰离子或者锌离子即可进行实验。在电泳过程中,磷酸化蛋白的磷酸基团与Phos-tag™中的二价金属离子相结合,降低其迁移速度,从而可区分磷酸化与非磷酸化蛋白。
Phos-tag™ Biotin 是与生物素结合的 Phos-tag™,可用于免疫印迹法检测磷酸化蛋白。Phos-tag™ Biotin BTL-104 和 BTL-105 可灵敏检测 PVDF 膜上的磷酸化蛋白。 ◆原理 ◆优点、特色 ●无辐射。 ●无需 PVDF 膜的封闭处理。 ●Phos-tag™的特异性结合与氨基酸种类、序列无关。