方法:以pcDNA3.1-Myc-Nrx 1β真核表达载体为模板,经PCR扩增Nrx 1β目的基因,然后将其亚克隆入pGEX-4T-1载体,构建其原核表达载体,转化入宿主菌BL21,选用IPTG进行诱导表达,优化表达条件,SDS-PAGE检测Nrx 1β的蛋白表达。结果:Nrx 1β目的基因扩增成功,经克隆后成功连接至pGEX-4T-1,重组体酶切结果及测
I,NI等,可转化进大肠杆菌中高拷贝表达。pGEX-‐4T-‐载体是一种常 用的原核表达载体,该载体多克隆位点区域含有多个常用的内切酶位点 序列,便于不同基因的克隆;且全序列中含有a启动子、GST标签序 列,是一种高效的蛋白表达载体。Ta启动子在没有诱导物存在的情况 ...
pGEX-4T-1是一个大肠杆菌蛋白表达载体,复制子是pMB1,限制性内切前酶切位点有BamHI,EcoRI Smal,Sal l,XhoI,Not I等,可转化进大肠杆菌中高拷贝表达。pGEX-4T-1载体是一种常用的原核表达载体,该载体多克隆位点区域含有多个常用的内切酶位点序列,便于不同基因的克隆;且全序列中含有tac启动子、GST标签序列,是一...
下,质粒上携带的lacIq基因产物可以有效抑制tac启动子的转录。可在 BL21、Rosstea等表达菌株中高表达融合有GST标签的蛋白,且用凝血 酶可将目的蛋白的GST标签切掉,便于下游蛋白纯化。稳定性: 瞬时表达 Transient 组成型: 诱导表达 病毒/非病毒: 非病毒 pGEX4T1载体质粒图谱和多克隆位点信息
产品别称:pGEX4T1;pGEX4T-1 启动子:Tac 复制子:pBR322 质粒分类:大肠杆菌载体;pGEX系列表达质粒 质粒大小:4969bp 质粒标签:N-GST, N-thrombin 克隆菌株:DH5a 培养条件:37度 表达宿主:大肠杆菌BL21 DE3 培养条件:37℃,有氧,LB 诱导方式:IPTG或乳糖及其类似物 5'测序引物:pGEX5: GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG 3...
中文名称: pGEX-4T-1 载体 英文名称: pGEX-4T- 保存条件: 常温运输 纯度规格: 99% 产品类别: 质粒/载体 pGEX-4T-1 载体 ▼ 别名: pGEX-4T-1, pGEX4T1, pGEX 4T 1 质粒类型: 大肠杆菌表达载体 表达水平: 高拷贝 启动子: Tac 克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶 载体大小: 4969 bp (...
a1.Activated plate— 热休克蛋白分子(热休克蛋白分子可能直接运载抗 lets release two types of membrane vesicles:microvesicles by 原到外泌体上),四聚体分子(CD9,CD63,CD81, surface shedding and exosomes derived from exocytosis of CD62),共刺激分子和代谢酶等”’61。由于其生物合 ...
(7)在500μL水中加人2滴(40~50μL)10mg/mL溴化乙锭保存液(EB终浓度0.5~1μg/mL),混匀。 (8)将凝胶轻轻滑入染色液,染色20~30min。 (9)取出凝胶,用水稍漂洗。 (10)紫外灯下确定DNA区带。 五、重组质粒pGEX-4T-1/His6-C-X的诱导表达及鉴定 1.原理Ptac启动子受扁阻遏物所调控,该启动子需要加入...
原核表达载体pGEX-4T-1/Snapin的构建和表达鉴定 刘奇,汤俊明(宜兴市人民医院检验科,江苏宜兴214200) 摘要:目的构建pGEX-4T-1/Snapin原核表达载体并在大肠埃希菌中高效表达,以纯化得到Snapin/GST融合蛋白。方法 用RT-PCR从小鼠血小板RNA中扩增Snapin基因。将目的片段装入原核表达载体pGEX-4T-1并转化至大肠埃希菌E....