pGEX-4T-1是一个大肠杆菌蛋白表达载体,复制子是pMB1,限制性内切前酶切位点有BamHI,EcoRI Smal,Sal l,XhoI,Not I等,可转化进大肠杆菌中高拷贝表达。pGEX-4T-1载体是一种常用的原核表达载体,该载体多克隆位点区域含有多个常用的内切酶位点序列,便于不同基因的克隆;且全序列中含有tac启动子、GST标签序列,是一...
Dntps(2.5mM) Primer-f Primer-R KOD E dd water Total 酶切: dd water 10X buffer DNA EcoR I Xho I Total dd water 10X buffer DNA EcoR I Xho I Total 8 1 1 1 13.5 50 ul 24 4 10 1 1 40 ul 32.5 4 2 ug 1 1 40 ul 37℃,2 h。做两个单酶切位点,加上一个未酶切的载体做对照...
备注: 复制子是pMB1，限制性内切酶酶切位点有 BamHI,EcoRI S maI,Sal I,Xho I,Not I等，可转化进大肠杆菌中高拷贝表达。用的原核表达载体，该载体多克隆位点区域含有多个常用的内切酶位点 序列，便于不同基因的克隆；且全序列中含有tac启动子、GST标签序 列，是一种高效的蛋白表达载体。Tac启...
天然存在的野生型质粒由于分子量大、拷贝数低、单一酶切位点少、遗传标记不理想等缺陷,不能满足克隆载体的要求,因此往往需要以多种野生型质粒为基础进行人工构建。 质粒载体按功能分: 克隆载体—都有一个松弛的复制子,能带动外源基因,在宿主细胞中复制扩增。它是用来克隆和扩增 DNA 片段(基因)的载体。
9个载体有扩展的多克隆位点(MCS),含有6个限制性酶切位点。扩展的MCS有助于从多种市售λ载体的文库构建物中获得cDNA片段的定向克隆。pGEX-6P-1、 pGEX-6P-2和pGEX-6P-3都在GST结构域和多克隆位点之间编码了PreScission 蛋白酶的识别位点,用于位点特异的切割。pGEX-4T-1、pGEX-4T-2 和pGEX-4T-3都来自pGEX...
备注: 复制子是 pMB1,限制性内切酶酶切位点有 BamHI,EcoRI SmaI,Sal I,Xho I,Not I 等,可转化进大肠杆菌中高拷贝表达。pGEX-4T-1 载体是一种常 用的原核表达载体,该载体多克隆位点区域含有多个常用的内切酶位点 序列,便于不同基因的克隆;且全序列中含有 tac 启动子、GST 标签序 ...
以大肠杆菌DH5α总DNA 为模板, 用PCR 法在γ -gg t 编码序列上下游引入酶切位点并扩增出γ - 谷氨酰转肽酶基因; 将γ -gg t 编码序列克隆入原核表达载体pGEX -4T -1 的相应酶切位点; 用PCR 鉴定重组质粒pGEX -4T-1/ γ -ggt , 并对插入基因片断测序; 重组质粒pGEX -4T -1/ γ -ggt 转化...
备注复制子是pMB,限制性内切酶酶切位点有BamHI,ERISmaI,SalI,Xh I,NI等,可转化进大肠杆菌中高拷贝表达。pGEX-‐4T-‐载体是一种常 用的原核表达载体,该载体多克隆位点区域含有多个常用的内切酶位点 序列,便于不同基因的克隆;且全序列中含有a启动子、GST标签序 ...
备注: 复制子是pMB1,限制性内切酶酶切位点有 BamHI,EcoRI SmaI,Sal I,Xho I,Not I等,可转化进大肠杆菌中高拷贝表达。pGEX-4T-1载体是一种常 用的原核表达载体,该载体多克隆位点区域含有多个常用的内切酶位点 序列,便于不同基因的克隆;且全序列中含有tac启动子、GST标签序 列,是一种高效的蛋白表达载体。
pgex-4t-1-usp原核表达载体构建 系统标签: 核表达载体pgexusp构建xho酶切 1.引物设计和订购 Forward:EcoRI—GTCGAATTCATGTGCGGCCGGTCTAAG Reverse:XhoI—CAACTCGAGTCAAGCCCCCTGCTCGTT 2.原核载体的构建 片段的克隆: 载体0.5 2XPpfubuffer25 Dntps(2.5mM)8 Primer-f1 Primer-R1 KODE1 ddwater13.5 Total50ul 酶...