亲,构建罗氏沼虾14-3-3的pET32a原核表达载体的步骤如下:(1) 在罗氏沼虾14-3-3 ORF序列的AatI和KpnI酶切位点进行PCR扩增。(2) 将扩增得到的PCR产物与pET32a载体通过KpnI和PstI两种酶将它们连接在一起,构建得到罗氏沼虾14-3-3的pET32a原核表达载体。(3) 在目的基因的N-或C-端加入His或GST等...
用pet32a构建表达载体,目的片段是220bp左右,酶切是ecor1和hindlll,但酶切连接转菌提质粒后却只有2000bp 把提到的质粒,双酶切,跑胶,看看是不是2条带,1条200多,1条5000多。如果是,就没问题,不用纠结了。 如果不是,那你的质粒有问题。
高效产氢功能基因载体pET32a-fdhF及其构建和应用专利信息由爱企查专利频道提供,高效产氢功能基因载体pET32a-fdhF及其构建和应用说明:高效产氢功能基因载体pET32a‑fdhF及其构建和应用涉及基因工程技术领域。pET32a‑f...专利查询请上爱企查
pET32a蜂毒素SP94表达载体构建流程图 (1)根据蜂毒素和SP94成熟肽的___序列,先将该序列转换成___,再通过逆转录得到___片段。要获得大量的该片段可以通过___技术进行扩增。 (2)将目的基因片段和质粒用限制酶___进行双酶切,回收目的基因片段与质粒的片段,用___连接,得到含有目的基因的重组质粒,转入经___处...
一般来说融合蛋白不影响gus的检测,不过影响不影响目的蛋白功能就不一定了。我个人倒是觉得,如果不做定位的的话,gus检测不是那么重要。可以把gus切下去(选用sacI位点)。pcr在基因组合转录组里面都能检测出来就认为目的基因正确表达了。要注意的是如果不融合的话别忘了CDS是要带终止密码子的。如果融合...
1.2.3 SmC4H-pET32a重组表达载体的构建 对SmC4H-pGM-T质粒进行EcoRⅤ、NotⅠ双酶切,回收获得SmC4H目的片段,将该目的片段插入到同样经过双酶切后的pET32a质粒载体片段中,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,涂布LB平板(含0.1 mg/mL Amp),随机挑取单克隆扩大培养,用小量质粒提取试剂盒抽提质粒并进行EcoRⅤ、NotⅠ双酶...
载体质粒 大肠杆菌(DH5a 、Stbl3等) pET32a-CUP1-2(yeast) pET32a-CUP1-2(yeast) 平台编号: zl-001387 相关信息: 大肠杆菌 产品规格: 1ug质粒干粉 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准) 加入订购 详情描述 售后服务 ...
结果与结论:实验成功扩增出 520 bp 的瘦素目的基因并构建了原核重组表达载体 pET-32a-瘦素;测序结果与 GenBank 收录序列相一致;目的蛋白 pET-32a-瘦素呈极高效表达,占总蛋白的 50%以上;变性复性后抗原反应原 性较复性前明显提高(P < 0.01).结果证实,实验成功构建原核重组高效表达的载体 pET-32a-瘦素,并提高其...
我最近在构建pet32a重组载体,酶切后跑胶显示是很整齐的一条带,五千多bp。我的目的片段大小是200多,...
泸州医学院硕士学位论文阴道毛滴虫黏附蛋白AP33基因的克隆及原核表达载体pET-32a(+)-ap33的构建姓名:***请学位级别:硕士专业:中西医结合基础指导教师:**西20080401英文缩略词WHoZyS硼DNGUAmp.X.GalE.coil英汉缩略词对照表英文全称中文WorldHealthOrganization世界卫生组织Trichomonasvaginalis阴道毛滴虫SexuallyTransmittedDisea...