直接用引物扩增目的片段，回收，将回收的扩增产物进行双酶切，再回收，回收的东西就可以和载体是pet32a...
摘要:高效产氢功能基因载体pET32a‑fdhF及其构建和应用涉及基因工程技术领域。pET32a‑fdhF基因载体为包含有蜡状芽孢杆菌甲酸脱氢酶fdhF基因的pET32a质粒。其构建是通过设计引物扩增蜡状芽孢杆菌中甲酸脱氢酶fdhF基因片段,并用重组酶将其连接到含有对应连接末端的pET32a片段中,进行基因测序,验证基因的完整性。将pET32a...
经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达后用SDS-PAGE和Western blotting对表达产物分别进行分析和鉴定.然后对重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达条件进行了优化.结果显示重组载体pET32a-SrtA_(△N24)和pET32a-SrtA_(△N59)分别表达出相对分子量为约42 kD和37 kD的融合蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting...
高效产氢功能基因载体pET32a-fdhF及其构建和应用专利信息由爱企查专利频道提供,高效产氢功能基因载体pET32a-fdhF及其构建和应用说明:高效产氢功能基因载体pET32a‑fdhF及其构建和应用涉及基因工程技术领域。pET32a‑f...专利查询请上爱企查
出售毕赤酵母GS115菌株、pet-28a质粒、pet-32a质粒和pPIC9K质粒!!! 综合广告推广 其他 第20页 小木虫 论坛
利用PCR技术从猪瘟免疫猪血中提取基因组,并从中扩增出约500bp的基因片段;将此基因片段克隆于大肠杆菌pMD18-T载体,经PCR,测序鉴定后,将其片段克隆于pET32a(+)载体进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE检测,结果表明,猪α干扰素在pET32a原核表达载体中成功地获得了分泌表达,且表达蛋白在PK-15细胞上表现出较强的抗病毒活...
这说明你的目的蛋白没有表达，因为PET32a空载表达的蛋白就有20KD左右，当然诱导时间长了表达量就会越大
用pet32a构建表达载体,目的片段是220bp左右,酶切是ecor1和hindlll,但酶切连接转菌提质粒后却只有2000bp 把提到的质粒,双酶切,跑胶,看看是不是2条带,1条200多,1条5000多。如果是,就没问题,不用纠结了。 如果不是,那你的质粒有问题。
pet28a和pet30a载体的区别：pet - 28a载体shibiaodazaitima是表达载体，PET-28a表达载体具有T7启动子及lac调控子，需要较高的IPTG起始浓度才能启动有效表达。pet30a质粒类型是大肠杆菌蛋白表达，表达水平较高，克隆方法是多克隆位点，限制性内切酶；载体大小是5422 bp。pet - 28a载体shibiaodazaitima是表达...
主要看，你后续实验了，要纯化不？还是要用于制备抗体等。pET32a有个11kDa的用于分泌到膜间腔的导肽，有利于表达蛋白的折叠。