1. 现要求以某一植物或动物组织cDNA为模板扩增A基因,并构建该基因的重组表达质粒pET28aA,并在大肠杆菌BL21中进行表达。[宁波大学2019研]相关知识点: 试题来源: 解析 答案: (1)从组织中提取RNA的步骤如下: ①将组织在液氮中会磨碎,每50~100mg组织加入1ml TRIzol裂解液溶解样品,充分吹打混匀。 ②每1ml TRIzol...
1 可能是太弱你看不出来,建议用His抗体做个western 看看是不是有条带而看不出。2 是不是融解性太差,建议将你的氨基酸序列做个疏水性分析。如果确实如此的话可能要重新构载体
含产气荚膜梭菌肠毒素基因重组质粒pET-28a—CPE的构建和表达
笔者研究考虑到蜂毒前溶血肽原自身具有较大的溶解度,对细胞膜的破坏能力较低,尝试使用分子量较小的Hm标签,将改造后的蜂毒前溶血肽原基因由重组质粒pGEX-4TB/PPMe-重构到pET-28a(+)载体上,构建了pET-28a(+)-PPMS重组质粒,并对其进行生物信息学方面分析,为探讨其在原核细胞中的表达提供基础% 1材料和方法 1...
请教万能的虫子们,我最近在构建PET28a重组质粒,目的基因1200左右,之前的pcr和酶切胶回收没有问题,...
为了探讨利用基因工程技术生产蜂毒肽的方法,对重组质粒pGEX-4T-1/PPMel中的蜂毒前溶血肽原基因进行了更换载体处理,并重新构建了蜂毒前溶血肽原重组质粒pET-28a(+)-PPMel,为进一步转化大肠杆菌感受态细胞并进行蜂毒前溶血肽原基因的表达提供了材料.相关序列的生物信息学分析表明,新的重组质粒可表达舍有106个氨基酸残基...
中国医科大学硕士学位论文尿液检测HIV抗体胶体金免疫层析快速诊断试纸条的研制以及pET28a-gp41重组质粒的构建姓名:***学位级别:硕士专业:生物化学与分子生物学指导教师:**夫20090401・中文摘要・目的获得性免疫缺陷综合征(AcquiredImmunodeficiencySyndrome,AIDS)是由人免疫缺陷病毒(HumanImmunodeficiencyVirus,HIV)感染所致...
一般目的基因和载体应该是10:1,所以可以尝试精确计算。16摄氏度过夜连接也可以试试。
现要求以某一植物或动物组织cDNA为模板扩增A基因,并构建该基因的重组表达质粒pET-28a-A,并在大肠杆菌BL21中进行表达。1写出从组织中抽取RNA的关键步骤,并解释如何判断RNA质量。2根据A基因序列设计原核表达引物。引物设计必须满足:1)要求在引物两端分别加上BamHI(GGATCC)
英语翻译 本文通过PCR、转化、提质粒、酶切、连主要接、纯化等步骤构建了质粒pET28a-NULP1.先通过PCR扩增出了nulp1,并将nulp1连接入pMD18-