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掌握常用的小量制备载体质粒DNA的碱裂解(碱变性)方法。 二、原理 适当浓度的葡萄糖和适当pH值的Tris-Cl使菌体在溶液中悬浮,加入EDTA可抑制DNase的活性,加入NaOH使细胞溶解,释放出质粒,加入酸中和,SDS与K+则形成大量沉淀(PDS),并使蛋白质和基因组DNA同时沉淀,而质粒则溶于水相,离心后,用碱性苯酚和氯仿继续除去...
pET28质粒图谱_生物学_自然科学_专业资料。pET-28a-c(+) Vectors pET-28a DNA pET-28b DNA pET-28c DNA Cat. No. 69864-3 69865-3 69866-3 TB074 12/ pET-28a-c(+) Vectors pET-28a DNA pET-28b DNA pET-28c DNA Cat. No. 69864-3 69865-3 69866-3 TB074 12/98 The pET-28a-c(+) ...
pET-28c(+) is a5367bp plasmid; subtract 2bp from each sitebeyond BamH I at 198. pET-28a-c(+) VectorslacI (773-1 852)ori (3286)Kan (3995-4807)f1 origin (4903-5358)Bpu1 1 02 I(80)Xba I(335)Bgl II(401 )SgrA I(442)Sph I(598)Mlu I(1 1 23)Bcl I(1 1 37)BstE II(1...
PET28_MAPPET28MAP质粒质粒图谱图谱地图28A PET28_MAP PET28质粒图谱,PET28_MAP PET28质粒图谱,PET28_MAP,PET,28,MAP,质粒,质粒图谱,图谱,地图,+,28A 君,已阅读到文档的结尾了呢~~ 立即下载相似精选,再来一篇 xuebxi 分享于2014-01-06 10:04
提取pet28质粒时,怎样才能得到高的浓度 Axugen的试剂盒已经很不错了,要是提不出浓度很高的质粒,可以试试下面的一些方法:1、增加收菌次数,相对提高了质粒的量,这样的话裂解液的量可以适当增加;2、裂解要充分,变性和复性按说明应该是不超过5分钟,合理控制时间,一般在3分到4分半的时间都是可以的;...
质粒信息: pET28GST-LIC大肠表达质粒 宿主分类:大肠杆菌质粒 用途:蛋白表达 抗性:Kan 菌株:DH5α 培养条件:37℃ 启动子:T7 复制子:ColE1ori 终止子:T7terminator 质粒大小:4640bp 质粒标签:N-T7 分类:大肠杆菌质粒 用途:蛋白表达 质粒相关图谱、序列及其他内容可查询公司官司网 电话:17317861055 QQ:570992151...
>>> pET-28(a)+质粒的拷贝数在细菌里本身就是很低,所以和其他质粒相比量会少一些,你可以多摇一段时间,16-18h都没有问题。 略微提高抗生素的浓度,有助于提高拷贝数。还有就是不要用BL21等表达菌提质粒,表达菌多没有endA-突变,质粒的完整性和保真性都不如DH5alpha,TOP10等菌,提取的...
后来发现是质粒量太少,酶切鉴定不成功。明天诱导表达。哈哈,你也加油啊,相信自己。[Last edited by ...
pET28TEV-LbCas12a 质粒是 LbCas12a (又名 LbCpf1) 蛋白的表达质粒,用于在大肠杆菌 BL21 (DE3) 菌株中表达制备 LbCas12a 蛋白。该质粒含有乳糖操纵子诱导表 达系统,可以用 IPTG 或乳糖及其类似物诱导表达目的蛋白。 LbCas12a 来源于 Lachnospiraceae bacterium ND2006 菌株。LbCas12a 是由 crRNA 介导的 DNA...