PEGFP-C1重组质粒目的:构建含有PHF6基因的PEGFP-C1-PHF6重组质粒并对重组质粒进行鉴定,为进一步研究其在核仁中的定位和功能奠定基础。方法:野生型293细胞中提取总RNA,反转录为cDNA后采用聚合酶链反应从总cDNA中扩增出PHF6基因,上下游分别引入EcoRⅠ及BamHⅠ酶切位点,双酶切后将其插入PEGFP-C1质粒中,构建PEGFP-C1...
pEGFP-Fbxl16-r-FLAG质粒构建是一个大肠杆菌表达载体,Tac强启动子可以驱动GST促溶标签和目的基因融合表达,LacI阻碍蛋白和Laco操作子使本质粒在没有加入IPTG之前禁止表达,防止其影响细菌生长。表达后的融合蛋白可用凝血酶蛋白酶切割,再过一次GST柱子即可清除掉GST标签。 产品相册pEGFP-Fbxl16-r-FLAG质粒构建CTTTCCTGCGTT...
质粒提取试剂盒限制性核酸内切酶 仪器、耗材 离心机振荡培养箱电泳装置冰盒恒温水浴箱 实验步骤 1. 挑取含有目的DNA重组体的单个菌落接种在3 ml LB(含有Amp或Kan)液体培养基中,37 ℃,225 rpm培养12～16 hrs。 2. 提取质粒 ⑴离心菌液,废弃上清。 ⑵加入250 ul Buffer P1,使菌片重悬,务必使片状物不可见。 ⑶...
结果成功构建pEGFP-C2-MeCP2重组质粒,酶切鉴定片段为1461bp。MeCP2蛋白及基因表达水平明显增加。细胞定位实验结果显示MeCP2蛋白定位于胞核。结论成功构建重组质粒pEGFP-C2-MeCP2,该质粒的构建为进行MeCP2功能研究提供了依据。关键词MeCP2;COS-7;基因表达中图分类号R349.64 文献标志码A文章编号1000-1492(2014)09...
鼠源pEGFP-C2-NLRC5重组质粒的构建及其表达
』!pEGFP—C 1一反义生存素重组质粒的构建和转染邹冰涂水平谭继宏马天乐钟捷乔敏敏付华江石湖R ]3一【摘要】目的构建p E(jFP—f 1一反义生存素( surv—vin )重组质粒. 并转染人人M KN,4 5低分化胃腺癌细胞株。 观察转染前后生存素基罔的表达及对凋亡的影响. 从基罔水平探讨反义生存素核酸治疗胃癌的分子...
pEGFP-C1/U6 质粒载体介导的表达MDR1 shRNA 的质粒构建 【摘要】 为了构建pEGFP-C1/U6 载体介导MDR1 短发卡RNA(short hairpin RNA..
pEGFP—C2-NLRC5重组质粒的构建及其表达
重组真核质粒pEGFP-C2-hG3BP-Domain(1～5)的构建及表达
pEGFP-C3-hNIS重组质粒的构建及其在人胃癌BGC-823细胞的表达