摘要: 目的:构建靶向PD-L1基因的CRISPR/Cas9基因敲除质粒.方法:根据CRISPR/Cas9靶点设计原则,设计并合成靶向PD-L1基因的5对sgRNA序列.为了进一步降低克隆背景和提高构建阳性率,在受体载体中引入毒性蛋白系统(Ccd).构建pX459-CcdB重组载体,将pX459-CcdB载体进行BbsⅠ酶切,... 查看全部>>