为了更详细地分析PD-1+ TAM,作者对PD-1+ TAM和PD-1低表达或PD-1阴性(PD-1low/PD-1)的TAM进行了荧光激活细胞分选(FACS),用于进行大量RNA-seq。与PD-1low/−群体相比,PD-1+分选TAM中Pdcd1表达水平显著增加,从而验证了PD-1+ FACS分选的有效性。PD-1+ TAMs在增殖、MYC和mTORC1通路信号传导方面更为丰富...
在人源化 PD-L1 MC38 皮下肿瘤和/或肝转移小鼠模型中评估了体内 PK/PD/药效。使用与PD-L1抑制剂竞争的MIH1 PD-L1抗体,通过FACS评估靶标接合度。与未经治疗的对照组相比,使用中位数荧光强度计算目标接触百分比。将hu-PD-L1 MC38细胞皮下植入小鼠,并给小鼠注射药物或指定化合物。(A)通过测定肿瘤体积来评价...
然后洗涤孵育细胞与PD-1-PE以及表达标签抗体的荧光二抗(Anti-mouse-488)混匀孵育1h,最后洗涤细胞上流式细胞仪进行分选操作,标记出正常表达(存在较高荧光信号488)单细胞群中具有PD-L1结合信号(存在较高荧光
将健康供体的NK细胞与K562肿瘤细胞共培养后,经FACS分选出PD-L1- NK及PD-L1+ NK两类细胞,并通过RNA Microarray分析对比其基因表达差异,作者团队发现多个与NK细胞成熟及活化相关基因有显著变化,另一个表达显著变化是AKT(AKT1/2/3)(图8),AKT与多个信号通路相关,对细胞的基因表达调控有重要意义。通过使用不同的选择...
图1: 在乳腺癌细胞中基于FACS的CRISPR-Cas9基因筛选。 SMARCAL1在维持基因组稳定性中扮演关键角色,其缺陷会导致细胞免疫信号上调,这与基因组不稳定性有关。基因组的不稳定性可以触发癌症内在的先天免疫反应,从而促进肿瘤排斥反应。SMARCAL1缺...
研究中,我们在N87胃癌细胞系中进行了基于FACS的全基因组CRISPR-Cas9筛选。使用MAGeCK分析并比较了PD-L1低亚群和高PD-L1亚群之间的sgRNA丰度。我们的筛选确定TRIM28,也称为TIF1β和KAP1,是PD-L1的顶级假定调节因子之一。我们进行了几项生化分析,以阐明TRIM28对G.C.细胞中PD-L1稳定性和表达的影响。为了研究...
将健康供体的NK细胞与K562肿瘤细胞共培养后,经FACS分选出PD-L1-NK及PD-L1+NK两类细胞,并通过RNA Microarray分析对比其基因表达差异,作者团队发现多个与NK细胞成熟及活化相关基因有显著变化,另一个表达显著变化是AKT(AKT1/2/3)(图8),AKT与多个信号通路相关,对细胞的基因表达调控有重要意义。通过使用不同的选择性...
图6. L-天冬氨酸、地塞米松和长春新碱联合化疗后PD-1+ T-ALL细胞应答谱系追踪策略示意图(c);在移植后的指定时间接受他莫西芬和化疗的GFP+ PD-1- T - ALL细胞和GFP+ PD-1+ T-ALL细胞在T - ALL BM中的代表性FACS图(左)和...
研究结果显示,含有新型siRNA稳定化学成分的非结合型 ALG-072571 在 SNU-387 细胞中减少hPD-L1 RNA的EC50为90 pM。在PD研究中,单次SC 7.5 mg/kg剂量的ALG-072571使肝脏 hPD-L1 RNA 减少71%,蛋白质减少45%。在平行的FACS分析中,肝脏CD45+免疫细胞中的细胞表面hPD-L1水平降低了19%,Kupffer细胞降低了37%...
抗体与抗原、细胞或组织的结合特性通常可以使用免疫检测方法来确定和评估,包括例如基于免疫荧光的分析,例如免疫组织化学(ihc)和/或荧光激活细胞分选(facs)。通常,抗体以与kd相对应的亲和力结合到预定抗原,该亲和力比结合到非特异性抗原(例如bsa、酪蛋白)的kd低至少十倍,例如低至少100倍,例如低至少1000倍,例如低至少...