本发明利用CRISPR/CAS9技术高效转化水稻敲除相关基因得到一种载体,该载体被命名为pCXUN‑CAS9‑sgRNA。所述的载体包含有如序列表SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明利用sgRNA方法突变水稻靶基因得到高效转化载体,是一种一元载体,本发明的重组载体可用于定向突变水稻靶基因,研究水稻中相关基因的功能和作用,也可以...
1.一种高效转化水稻的载体pCXUN-Cas9-sgRNA,其特征在于,该载体通过下列步骤制备获得: (1)以SEQ ID NO:1所示的序列的起始载体pCXUN为材料,用Xcm1切除该载体中的登陆号为NC_007635.1的ccd基因; (2)在步骤(1)所述的Xcm1切除了载体ccd基因的位置,即744-438碱基位上定向插入SEQ ID NO:4所示的CAS9基因片段,得到如...