PCV2 Cap蛋白原核表达多克隆抗体猪圆环病毒2型是一种常见的猪感染性病毒,Cap蛋白为猪圆环病毒2型的核衣壳蛋白,也是该病毒最主要的结构蛋白,是目前猪圆环病毒2型基因工程疫苗研制的关键蛋白.研究构建了Cap蛋白原核表达质粒pET28a-His-Cap,转化Transetta(DE3)表达菌株,IPTG诱导表达,经SD
PCV2-Cap-VLPs表达及纯化 sf9细胞以2×106/ml瓶接种于500ml细胞培养瓶中;待细胞生长至对数期,接P2代Bacmid病毒感染sf9细胞;48~72h内收集细胞及上清,用于重组蛋白表达的检测。 1.细胞培养及病毒培养(略) 2.收获Cap-VLP:Bac-to-Bac分泌表达的...
PCV2具有致病性,基因组全长1767bp或1768bp,包括11个读码框,其中ORF2编码病毒的主要结构蛋白)核衣壳蛋白( Cap),其N端包含一个由41个氨基酸残基组成的的核定位信号( Nuclear location signal,NLS),与PCV2在细胞核内定位有关。Mahe和Liu等分别在sf 9真核细胞及大肠杆菌中进行了PCV2Cap蛋白的表达,但Cap蛋白的...
在制备抗PCV2单克隆抗体的过程中,首先需要选择合适的免疫原。PCV2的Cap蛋白作为病毒的主要结构蛋白,具有良好的免疫原性,因此常被用作制备单克隆抗体的免疫原。通过对Cap蛋白进行原核表达,我们可以获得大量纯度较高的蛋白,用于免疫动物并制备单克隆抗体。 免疫动物的选择也是制备单克隆抗体的关键步骤之一。通常,选择具有...
为了实现酵母表达的pcv2 cap蛋白在猪体的免疫特性,需要猪α干扰素与酵母表达的pcv2 cap蛋白组成疫苗,单位是亚,或者把一定数量的铝胶与酵母表达的pcv2 cap蛋白组成疫苗,单位是亚;把刚刚断奶28天猪仔中一组接种亚单位的猪α干扰素重组,把另一组接种亚单位的铝胶佐剂,建立对照表格,分别显示空白对照的数据以及功毒对照...
本发明提供一种表达PCV2Cap蛋白的JEV复制子质粒的构建方法与应用,其采用基因I型日本脑炎病毒的基因组,该基因组已缺失C、prM和E结构蛋白基因,在缺失的结构蛋白区域嵌入猪圆环病毒2型的Cap蛋白基因,从而成功构建了能够高效表达PCV2Cap蛋白的pJEV‑CMV‑PCV2a Cap、pJEV‑CMV‑PCV2b Cap、pJEV‑CMV‑PCV...
摘要:为研发高效的猪圆环病毒2型(PCV2)黏膜疫苗,通过口服、肌内和滴鼻途径,将表达PCV2Cap蛋白主要抗原表位的重组复制缺陷型腺病毒(rAd/Cap/518)免疫Balb/c小鼠,同时以无外源基因的空腺病毒(wild-rAd)经滴鼻途径免疫Balb/c小鼠作为对照组,分别检测小鼠血清中IgG和唾液、肺部、肠道灌洗液中IgA抗体水平,脾脏T淋巴细...
PCV2 Cap蛋白羧基端氨基酸残基的功能性研究 猪圆环病毒2型被认为是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征及圆环病毒相关疾病的主要病原体,并与其他病原体造成混合型感染。给养殖业造成了重大的经济损失,疫苗的正确使用是防止PCV2流行及相关疾病的主要手段之一。为揭示PCV2组装、细胞入侵以及复制扩增原理,本研究的主要内容如下:...
国外已有3种基于PCV2 Cap蛋白亚单位疫苗注册上市,分别是勃林格公司研制的IngeIvac CircoFLEX ® ,英特威公司研制的Circumvent ®以及先灵葆雅公司研制的Porcilis®PCV,这3种疫苗均为杆状病毒表达的Cap蛋白亚单位疫苗。国内目前有青岛易邦生产的大肠杆菌表达的亚单位疫苗、武汉中博以及扬州优邦生产的杆状病毒载体表达的...
BcdCp 以脂质体介导的方法将重 组穿梭 载体 转染 s 昆虫 细胞 ,aami.a, 获得 重组病 毒rBcea— CpP R能够扩增 出相应大小 的片段 ,a,C 间接免疫荧光分析表 明,C 2阳性血清能使 rBcCp染的s 昆虫 细胞出现 PVea—a感 特异性绿色荧光 , 表明 rBcC p在s 细胞 中成功表达 PV一aea.a C2C p蛋白。动...