本发明属于生物技术构建领域,具体公开了一种重组人PCSK9蛋白在CHOK1细胞中的表达纯化方法,包括真核表达载体pCMVpcsk9His的构建,CHOK1细胞的转染,细胞培养,重组人PCSK9蛋白的纯化等步骤,其中重组人PCSK9蛋白的纯化采用亲和层析,尺寸排阻层析,阴离子交换层析三步,获得的重组蛋白纯度更高,更加利于研究其功能和性质,减少PCSK9蛋白抑制剂筛选过程中的...
1、可以在两个月内获高纯度有生物学活性的重组人pcsk9蛋白,该蛋白的表达量和纯度完全可以支撑pcsk9蛋白抑制剂的前期筛选工作。cho-k1是表达重组蛋白的常用细胞系,选用该细胞系是因为cho-k1便于后续蛋白质生产的放大,cho-k1可以经过驯化培养成悬浮细胞,可以用于工业生产。另外本方法首次采用三步层析对重组pcsk9蛋白进...