1.耗材选择不当对实验结果造成很大的影响 PCR耗材一般都是聚丙烯(PP)材质,因其为生物学惰性材料,表面不易于粘附生物分子,且有着良好的化学耐性,及温度耐受性(可121℃高压灭菌,也可以承受热循环过程中的温度变化)。这些材料通常会与试剂或者样品直接接触,因而在生产制备过程中需要选用高质量的材料和良好的加工
具体步骤是将样本的RNA模板与逆转录酶一起进行反应,同时准备另一个样本,仅将RNA模板与反应体系中的其他成分混合,而不加入逆转录酶。这样的设置能够帮助我们确定是否发生了基因组DNA污染。随后,可以通过PCR扩增并电泳检测这两个样本的RT-PCR产物。如果阴性对照样本中也出现了明显的条带,那么说明实验模板...
第五条泳道是marker,用来指示DNA大小,电泳必跑,如果PCR产物大小对了,有很大可能性你P出来了对的东西...
结果1 结果2 题目PCR产物测序结果分析。测序后将序列图在NCBI上blast以后,发现有不匹配,该怎么判断这个是突变还是SNP位点呢?相关知识点: 试题来源: 解析 SNP位点基本可以认为就是‘突变型—野生型’的关系。 如果你发现了一些点与预期的不同,可能是SNP,也有可能是测序本身的错误。另外,测序靠近测序引物开端的50bp...
回答者:网友 区分你的模板里面是否有基因组污染的方法:在做逆转录反应的同时,做一个阴性对照,其他所境婷亚初守也验己有都和实验组相同,除了不加入逆转录酶。得到RT-PCR产物后跑胶,如果该阴性对照里也扩增出来土脸的米长地算什明显条带的话,你的模板就是有基因组污染,否则就是正常。我来回答 提交回答 重置等...
- 有内参是要做相对定量,用dental dental t法做咯,看表达差异。应该有软件直接可以分析的吧 ...
U6作为上样量的对照,miR -21出条带了,在U6标示上样量一致的条件下表现出 xx 趋势,说明 xx 。其...
PCR产物测序结果分析。测序后将序列图在NCBI上blast以后,发现有不匹配,该怎么判断这个是突变还是SNP位点呢? 相关知识点: 试题来源: 解析 SNP位点基本可以认为就是‘突变型—野生型’的关系。如果你发现了一些点与预期的不同,可能是SNP,也有可能是测序本身的错误。另外,测序靠近测序引物开端的50bp可能不太准确。
(一)实时荧光定量PCR实验会产生大量实验数据,一般可以用PCR仪自带的软件进行收集、分析。但即使有了方便可靠的软件,我们也需要对原始数据进行检查、再分析,评估数据的质量和可靠性。第一步,查看扩增曲线,有必要时调整基线和阈值。Ct值由基线和阈值计算得来,所以他们的值对结果影响很大。软件会给出1个默认的基线和...
想定量分析,可以用imagej,如看一下条带的相对含量。定性分析就是你目标条带的大小位置和marker比是不...